pIRES-IL-24-PTEN双表达载体的构建及鉴定

• 作 者: 丁嵩涛?彭惠民?周宇箭?刘含登
• 出 处: 中国医药科学
• 发表日期: 2012年9期
• 关键词: PTEN IL-24 肿瘤 基因治疗 PTEN IL-24 Cancer Gene therapy

　　[摘要] 目的 构建携带人IL-24和10号染色体缺失的磷酸脂酶与PTEN双基因的真核表达载体，为研究其表达产物的抑癌机制提供基础。 方法 通过PCR方法获得PTEN、IL-24基因片段，进行T-A克隆，再酶切亚克隆到pIRES载体，酶切、测序鉴定正确后命名为pIRES-IL-24-PTEN载体。脂质体转染A549细胞，提取细胞的总蛋白，Western blot检测IL-24和PTEN蛋白的表达。 结果 酶切、测序显示pIRES-IL-24-PTEN载体序列正确，Western blot检测到IL-24和PTEN蛋白表达。 结论 成功构建pIRES-IL-24-PTEN载体，为后续研究奠定基础。
　　[关键词] PTEN；IL-24；肿瘤；基因治疗