【摘 要】
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为探究犬MDCK细胞株中γ-干扰素(IFN-γ)诱导的免疫相关的GTP酶(IRGs)在刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)的纳虫空泡膜表面的定位情况,本研究采用慢病毒包装载体将Irgb11与GFP
【机 构】
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黑龙江八一农垦大学动物科技学院,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江省农垦总局动物卫生监督所
【基金项目】
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黑龙江省青年科学基金项目(QC2017030);兽医生物技术国家重点实验室项目(SKLVBF201704)
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为探究犬MDCK细胞株中γ-干扰素(IFN-γ)诱导的免疫相关的GTP酶(IRGs)在刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)的纳虫空泡膜表面的定位情况,本研究采用慢病毒包装载体将Irgb11与GFP融合基因引入犬MDCK细胞中,经荧光鉴定和western blotting方法检测到Irgb11-GFP融合蛋白的表达,成功构建稳定表达细胞系。采用IFN-γ诱导该细胞系24 h,接种弓形虫PLK株,以间接免疫荧光试验进行检测,并通过共聚焦激光扫描显微镜观察,结果显示Irgb11-GFP蛋白获得表达并能够与弓形虫PLK株的纳虫空泡膜(PVM)发生共定位,表明在犬MDCK细胞中,在IFN-γ存在的情况下,Irgb11可以被募集到弓形虫PVM表面,从而发挥其破坏弓形虫PVM的功能。本试验为进一步研究犬细胞中抑制弓形虫生长的机制奠定基础。
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