【摘 要】
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目的：建立一种稳定的成人原代肝细胞分离、培养、冻存方法,为肝细胞移植、生物人工肝支持系统治疗急慢性肝病以及肝细胞体外应用模型提供潜在的肝细胞资源.方法：20例供肝采用离
【机 构】
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南京医科大学附属南京第一医院普外科,南京大学医学院附属鼓楼医院肝胆外科
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目的：建立一种稳定的成人原代肝细胞分离、培养、冻存方法,为肝细胞移植、生物人工肝支持系统治疗急慢性肝病以及肝细胞体外应用模型提供潜在的肝细胞资源.方法：20例供肝采用离体两步胶原酶灌注技术分离成人原代肝细胞.选择7个不同的预培养时间点（2、6、12、24、36、48和72h）,分离所获肝细胞按上述不同预培养时间在4℃人无血清培养基（HepatoZYME-SFM）中培养,然后收集预培养肝细胞转移到含100mL/L胎牛血清和DMSO的HepatoZYME-SFM中,再立即放入-80℃异丙醇冷冻盒过夜,次日投入
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