长链非编码RNA Linc00461干扰慢病毒的构建与鉴定

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目的制备shRNA干扰人长链非编码RNA Linc00461的慢病毒载体(shRNA-Linc00461),为进一步深入研究长链非编码RNA的功能奠定基础。方法利用在线干扰设计网页进行干扰引物设计,根据小干扰RNA的设计原则,选取三对针对Linc00461特异性干扰引物送公司合成。合成的片段连接到慢病毒载体质粒p SIH1-H1,形成p SIH1-H1-shRNA-Linc00461质粒。用PCR及测序对其进行鉴定,之后与慢病毒包装质粒混匀,由脂质体转染至HEK293T细胞进行包装,产生慢病毒shRNA-
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