bEnd.3细胞来源外泌体促成骨效应的体外研究

• 作 者: 崔永志 刘平 梁涛 李锐 耿永涛 刘慧敏 傅德皓
• 机 构: 华中科技大学同济医学院附属协和医院骨科，武汉 430022,华中科技大学同济医学院附属梨园医院体检中心，武汉 430077,华中科技大学同济医学院附属协和医院检验科，武汉 430022,华中科技大学同
• 出 处: 中华实验外科杂志
• 发表日期: 2021年38期
• 关键词: 外泌体 骨质疏松症 骨髓间充质干细胞 内皮细胞 骨形成

目的

观察小鼠脑微血管内皮细胞bEnd.3来源的外泌体对骨髓间充质干细胞(BMSCs)成骨效应的影响。

方法

通过超高速离心法提取bEnd.3细胞来源的外泌体(b-Exo)，利用透射电子显微镜(TEM)、纳米粒径追踪分析(NTA)和外泌体蛋白标志物蛋白质印迹法(Western blot)实验鉴定所提取的外泌体。与磷酸盐缓冲液(PBS)对照，使用茜素红染色检测其对BMSCs基质矿化，反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测成骨分化相关基因Runx2、Osteopontin、Osteocalcin表达的影响。组间比较采用t检验。

结果

TEM下观察到b-Exo具有典型囊泡样结构，NTA显示b-Exo浓度为7.5×10¹⁰颗粒/ml，直径为(100.0±7.3) nm。b-Exo可显著增强BMSCs基质矿化，b-Exo组成骨分化相关基因核心结合蛋白因子2(Runx2)、骨桥蛋白(Osteopontin)和骨钙蛋白(Osteocalcin)的表达显著高于对照组(8.28±0.34比3.71±0.40，t＝4.974，P<0.01；9.19±1.91比4.09±0.88，t＝5.562，P<0.01；10.31±1.67比5.32±0.31，t＝5.432，P<0.01)，差异均有统计学意义。

结论

bEnd.3细胞来源的外泌体能够促进BMSCs的成骨分化，有望应用于骨再生和骨质疏松症的无细胞治疗。