【摘 要】
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目的 研究干扰长链非编码RNA(lncRNA)DBH-AS1是否通过上调微小RNA-149(miR-149)影响子宫内膜癌细胞的增殖、迁移与侵袭.方法 将子宫内膜癌细胞RL95-2分为si-DBH-AS1组(转染DBH-AS1小干扰RNA si-DBH-AS1)、si-NC 组(转染小干扰 RNA 阴性对照 si-NC)、si-DBH-AS1+anti-miR-149组(同时转染 si-DBH-AS1 和miR-149抑制剂 anti-miR-149)、si-DBH-AS1+anti-miR-NC 组(同
【机 构】
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金华市人民医院妇产科,浙江金华321000
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目的 研究干扰长链非编码RNA(lncRNA)DBH-AS1是否通过上调微小RNA-149(miR-149)影响子宫内膜癌细胞的增殖、迁移与侵袭.方法 将子宫内膜癌细胞RL95-2分为si-DBH-AS1组(转染DBH-AS1小干扰RNA si-DBH-AS1)、si-NC 组(转染小干扰 RNA 阴性对照 si-NC)、si-DBH-AS1+anti-miR-149组(同时转染 si-DBH-AS1 和miR-149抑制剂 anti-miR-149)、si-DBH-AS1+anti-miR-NC 组(同时转染 si-DBH-AS1 和 miR-149抑制剂阴性对照anti-miR-NC).采用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞中DBH-AS1和miR-149的表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,流式细胞术检测细胞周期,Transwell检测迁移、侵袭细胞数目,免疫印迹实验(Western blot)检测细胞核相关抗原Ki67、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白的表达.生物信息学预测与双荧光素酶实验DBH-AS1与miR-149的靶向结合.结果 24例子宫内膜癌组织中DBH-AS1的表达水平显著升高,miR-149的表达水平显著降低,二者呈显著负相关(P＜0.05).与si-NC组相比,si-DBH-AS1组子宫内膜癌细胞的存活率、S期细胞比例、迁移细胞数、侵袭细胞数、Ki67、N-cadherin蛋白表达水平显著减少,miR-149表达水平、G0-G1期细胞比例、E-cadherin的蛋白表达水平显著增加(P＜0.05).与si-DBH-AS1+anti-miR-NC组相比,si-DBH-AS1+anti-miR-149组显著提高子宫内膜癌细胞的存活率、S期细胞比例、迁移细胞数、侵袭细胞数、Ki67、N-cadherin蛋白表达水平,显著降低miR-149表达水平、G0-G1期细胞比例、E-cadherin的蛋白表达水平(P＜0.05).DBH-AS1可以靶向调控miR-149的表达.结论 干扰DBH-AS1可以上调miR-149的表达,抑制子宫内膜癌细胞的增殖、迁移与侵袭.
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