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摘要：
目的：分析PAI-1 4G/5G多态性与脓毒症发生发展的相关性。方法：对我院2010年8月到2012年8月收治的60例脓毒症患者以及60例正常人作为研究对象，进行回顾性分析，将60例脓毒症患者作为试验组，正常人员作为对照组，根据MODS的诊断标准采用聚合酶链反应结合限制性片段长度多态性方法（PCR-RFLP）分析各组中PAI-1和TLR4单个核苷酸多态性，比较试验组组和对照组中PAI-1基因型同等位基因的频率分布差异，比较PAI-1 4G/5G多态性与疾病发生的相关性。结果：在两组中，试验组中PAI-1 4G/5G在脓毒症组织表达中，试验组脓毒症组中，4G/5G多态性同脓毒症的易感性与转归呈正相关，两者之间有差异有统计学意义（P<0.5）。结论：在临床中，检测出PAI-1 4G/5G多态性与脓毒症的发生有关，在脓毒症的发生发展中与PAI-1和TLR4基因多态性有相关性，根据PAI-1 4G/5G变化提示，可以做好对脓毒症患者预后工作，值得在实际中推广。
关键词：PAI-1 4G；PAI-1 5G5；脓毒症；相关性
【中图分类号】
R632.5 【文献标识码】B 【文章编号】1002-3763（2014）06-0009-01
脓毒症在全球每年的总病例数约为1800万例，脓毒症的发生多与严重感染有关，会导致人体的多器官功能障碍甚至衰竭， 因此在实际中预防手术后严重感染，并合理救治患者是临床医生以及从事感染工作者的重要使命。
1 资料与方法
1.1 研究资料：
我院2010年8月到2012年8月收治的60例脓毒症患者作为研究对象，将其作为试验组，男患者为36例，女患者为24例，患者年龄在25岁～65岁，平均年龄在36.3±4.8岁，患者在检查前均没有使用类固醇激素以及其它免疫抑制剂；再选择60例身体正常的人员，使其作为对照组，男性35例，女性25例，年龄在25岁～65岁，平均年龄在36.3±4.8岁；两组中人员均签署知情书，两组差异无统计学意义，具有一定的可比性。
1.2 方法：
抽取两组人员的静脉血2 ml，应用2%乙二胺四乙酸二钠（EDTA）抗凝[1]，并在-80e冻存备用。在DNA的提取中，应用2% EDTA抗凝静脉血1m，使用酚-氯仿提取DNA，在紫外分光光度仪下进行定量。之后，扩增目的DNA片段，可以采用聚合酶链，根据其反应（PCR）特异性来扩增PAI-1基因序列。最后，对其进行多态性分析，可以应用5U Bsl1限制性内切酶对5Ll PCR产物进行酶切。由于Bsl1酶，以此来识别序列，将99 bp（5G）片段酶切成77 bp片段和22 bp片段，并以16%浓度的聚丙烯酰胺凝胶电泳，设置电为压180 V，时间为2.5 h，并在凝胶成像仪下观察溴化乙锭染色后的结果，从而确定基因型。
1.3 统计学处理：
对本次的试验结果，采用SPSS13.O统计软件[2]对实验数据进行统计分析，并且对于试验组与对照组指标的阳性率将会采用APACHⅡ评分；计量资料采用t检验，计数的资料采用x2检验，以P<0.05具有统计学意义。
2 结果
两组中脓毒症患者同正常人员的研究中，分析两组中的PAI-1基因型电泳结果，PAI-1基因4G/5G多态性与脓毒症发生发展表现出相关性，两组对象中的PAI-1 4G/5G基因型分布中，两组之间差异有统计学意义（P<0.5），患者的PAI-14G/5G基因型携带频率是0.44， 5G等位基因携带频率是0.65；对照组中的分别是0.25与0.50，同时在实验组脓毒症死亡与存活患者中的PAI-1 4G/5G基因也存在多态性，有统计学意义。
表1 两组中PAI-1 4G/5G基因型分布对比
表2 试验组存活与死亡患者PAI-1 4G/5G基因型分布
结果PAI-1 4G/5G的多态性，同脓毒症的易感性与转归呈正相关，具有一定相关性，对改善脓毒症患者预后有积极的影响。
3 讨论
据悉，脓毒症的基础病因目前还不清楚，先前研究中多认为与细胞因子炎症、纤维化有关。PAI-1 4G/5G多态性，就是指在基因转录的起始上游-675bp位置中，存在鸟苷插入与缺失，从而表现出三种多态性，导致 PAI-1基因的PCR产物也形成三种基因型，产生4G/5G基因型、5G/5G基因型、4G/5G基因型。
3.1 当前脓毒症治疗进展：
在医院临床治疗中，脓毒症作为预后差的疾病，及早发现、及早治疗已成为治愈脓毒症的关键。明确携带PAI-1那种基因型及等位基因脓毒症患者容易发展成MODS，携带那种PAI-1基因型及等位基因患者死亡率高，比较PAI-1 4G/5G，TLR4 Asp299Gly和Thr399Ile基因型的分布在各组的差异，根据PAI-1和TLR4基因多态性结果，综合脓毒症患者临床表现进行全面分析，科学提出脓毒症患者预后情况。
3.2 PAI-1 4G/5G多态性与发病之间的相关性：
PAI-1基因多态性与脓毒症发病相关性研究结果表明，患者PAI-1 4G/5G基因型频率高于正常人群，携带4G/5G基因型的个体，其发生脓毒症的风险较高；还有就是4G/5G基因型个体PAI-1活性水平高， 降低纤溶活性，使细胞的外基质更加稳定，加速了脓毒症的发展。
3.3 预后措施：
在脓毒症患者预后中，4G纯合子以及4G等位基因，是人体易感脓毒症的预警指标，基因多态性与脓毒症的发生发展具有一定的相关性，对此有助于实现对脓毒症的个体化防治。
由上可知，在临床脓毒症治疗中，根据PAI-1 4G/5G多态性与病情发展具有相关性，通过PAI-1 4G/5G多态性变化对脓毒症进行诊治，降低误诊的发生，提高诊治准确率，而且也将会提高患者的预后效果。
参考文献
[1] 倪俊学，王亚军，李平，付红敏，马燕，万健. 脓毒症患儿血浆胆固醇、白细胞介素-6水平变化与病情危重度的关系[J]. 实用儿科临床杂志，2012，07（18）：41-42.
[2] 饶小平，朱绿绮. 动态监测血乳酸对评估小儿脓毒症的临床意义[J]. 南昌大学学报（医学版），2011，14（12）：76-77. [J]. 实用药物与临床，2011，06（34）：45-46.
目的：分析PAI-1 4G/5G多态性与脓毒症发生发展的相关性。方法：对我院2010年8月到2012年8月收治的60例脓毒症患者以及60例正常人作为研究对象，进行回顾性分析，将60例脓毒症患者作为试验组，正常人员作为对照组，根据MODS的诊断标准采用聚合酶链反应结合限制性片段长度多态性方法（PCR-RFLP）分析各组中PAI-1和TLR4单个核苷酸多态性，比较试验组组和对照组中PAI-1基因型同等位基因的频率分布差异，比较PAI-1 4G/5G多态性与疾病发生的相关性。结果：在两组中，试验组中PAI-1 4G/5G在脓毒症组织表达中，试验组脓毒症组中，4G/5G多态性同脓毒症的易感性与转归呈正相关，两者之间有差异有统计学意义（P<0.5）。结论：在临床中，检测出PAI-1 4G/5G多态性与脓毒症的发生有关，在脓毒症的发生发展中与PAI-1和TLR4基因多态性有相关性，根据PAI-1 4G/5G变化提示，可以做好对脓毒症患者预后工作，值得在实际中推广。
关键词：PAI-1 4G；PAI-1 5G5；脓毒症；相关性
【中图分类号】
R632.5 【文献标识码】B 【文章编号】1002-3763（2014）06-0009-01
脓毒症在全球每年的总病例数约为1800万例，脓毒症的发生多与严重感染有关，会导致人体的多器官功能障碍甚至衰竭， 因此在实际中预防手术后严重感染，并合理救治患者是临床医生以及从事感染工作者的重要使命。
1 资料与方法
1.1 研究资料：
我院2010年8月到2012年8月收治的60例脓毒症患者作为研究对象，将其作为试验组，男患者为36例，女患者为24例，患者年龄在25岁～65岁，平均年龄在36.3±4.8岁，患者在检查前均没有使用类固醇激素以及其它免疫抑制剂；再选择60例身体正常的人员，使其作为对照组，男性35例，女性25例，年龄在25岁～65岁，平均年龄在36.3±4.8岁；两组中人员均签署知情书，两组差异无统计学意义，具有一定的可比性。
1.2 方法：
抽取两组人员的静脉血2 ml，应用2%乙二胺四乙酸二钠（EDTA）抗凝[1]，并在-80e冻存备用。在DNA的提取中，应用2% EDTA抗凝静脉血1m，使用酚-氯仿提取DNA，在紫外分光光度仪下进行定量。之后，扩增目的DNA片段，可以采用聚合酶链，根据其反应（PCR）特异性来扩增PAI-1基因序列。最后，对其进行多态性分析，可以应用5U Bsl1限制性内切酶对5Ll PCR产物进行酶切。由于Bsl1酶，以此来识别序列，将99 bp（5G）片段酶切成77 bp片段和22 bp片段，并以16%浓度的聚丙烯酰胺凝胶电泳，设置电为压180 V，时间为2.5 h，并在凝胶成像仪下观察溴化乙锭染色后的结果，从而确定基因型。
1.3 统计学处理：
对本次的试验结果，采用SPSS13.O统计软件[2]对实验数据进行统计分析，并且对于试验组与对照组指标的阳性率将会采用APACHⅡ评分；计量资料采用t检验，计数的资料采用x2检验，以P<0.05具有统计学意义。
2 结果
两组中脓毒症患者同正常人员的研究中，分析两组中的PAI-1基因型电泳结果，PAI-1基因4G/5G多态性与脓毒症发生发展表现出相关性，两组对象中的PAI-1 4G/5G基因型分布中，两组之间差异有统计学意义（P<0.5），患者的PAI-14G/5G基因型携带频率是0.44， 5G等位基因携带频率是0.65；对照组中的分别是0.25与0.50，同时在实验组脓毒症死亡与存活患者中的PAI-1 4G/5G基因也存在多态性，有统计学意义。
表1 两组中PAI-1 4G/5G基因型分布对比
表2 试验组存活与死亡患者PAI-1 4G/5G基因型分布
结果PAI-1 4G/5G的多态性，同脓毒症的易感性与转归呈正相关，具有一定相关性，对改善脓毒症患者预后有积极的影响。
3 讨论
据悉，脓毒症的基础病因目前还不清楚，先前研究中多认为与细胞因子炎症、纤维化有关。PAI-1 4G/5G多态性，就是指在基因转录的起始上游-675bp位置中，存在鸟苷插入与缺失，从而表现出三种多态性，导致 PAI-1基因的PCR产物也形成三种基因型，产生4G/5G基因型、5G/5G基因型、4G/5G基因型。
3.1 当前脓毒症治疗进展：
在医院临床治疗中，脓毒症作为预后差的疾病，及早发现、及早治疗已成为治愈脓毒症的关键。明确携带PAI-1那种基因型及等位基因脓毒症患者容易发展成MODS，携带那种PAI-1基因型及等位基因患者死亡率高，比较PAI-1 4G/5G，TLR4 Asp299Gly和Thr399Ile基因型的分布在各组的差异，根据PAI-1和TLR4基因多态性结果，综合脓毒症患者临床表现进行全面分析，科学提出脓毒症患者预后情况。
3.2 PAI-1 4G/5G多态性与发病之间的相关性：
PAI-1基因多态性与脓毒症发病相关性研究结果表明，患者PAI-1 4G/5G基因型频率高于正常人群，携带4G/5G基因型的个体，其发生脓毒症的风险较高；还有就是4G/5G基因型个体PAI-1活性水平高， 降低纤溶活性，使细胞的外基质更加稳定，加速了脓毒症的发展。
3.3 预后措施：
在脓毒症患者预后中，4G纯合子以及4G等位基因，是人体易感脓毒症的预警指标，基因多态性与脓毒症的发生发展具有一定的相关性，对此有助于实现对脓毒症的个体化防治。
由上可知，在临床脓毒症治疗中，根据PAI-1 4G/5G多态性与病情发展具有相关性，通过PAI-1 4G/5G多态性变化对脓毒症进行诊治，降低误诊的发生，提高诊治准确率，而且也将会提高患者的预后效果。
参考文献
[1] 倪俊学，王亚军，李平，付红敏，马燕，万健. 脓毒症患儿血浆胆固醇、白细胞介素-6水平变化与病情危重度的关系[J]. 实用儿科临床杂志，2012，07（18）：41-42.
[2] 饶小平，朱绿绮. 动态监测血乳酸对评估小儿脓毒症的临床意义[J]. 南昌大学学报（医学版），2011，14（12）：76-77. [J]. 实用药物与临床，2011，06（34）：45-46.