三种食源性致病菌多重PCR检测方法的建立

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目的:建立同时快速检测沙门氏菌、志贺氏菌和肠出血性大肠杆菌0157:H7的多重PCR方法。方法:根据沙门氏菌的invA基因、志贺氏菌的ipaH基因及肠出血性大肠杆菌0157:H7的uidA基因设计3对引物,通过单因素实验、L_9(3~4)正交实验优化反应体系,并对多重PCR扩增的敏感性进行分析。结果:3对引物能特异性扩增出495、620、252bp的目的片段;在最优多重PCR反应体系下,多重PCR检测3种致病菌的灵敏度达10~4CFU/mL;将该法应用于人工污染实验,可在5h内得到准确、稳定的检测结果。结
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