人巨细胞病毒糖蛋白52kD抗原编码区段在大肠杆菌中高效表达

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采用聚合酶链反应,从人巨细胞病毒重组质粒克隆pBH中扩增并分离了含糖蛋白52kD抗原编码区段;扩增产物经纯化和EcoR Ⅰ酶切后,与相同酶切的高效表达质粒pBV-220重组,构成含人巨细胞病毒糖蛋白52kD抗原编码区段的高效表达质粒pHcMV 52;用此重组表达质粒转化大肠杆菌JM101,经增殖和42℃温度诱导以及筛选。阳性克隆经12.5%SDS-PAGE表明,外源基因表达蛋白质量占菌体溶解液中蛋白质总量20%。蛋白质印迹(western blot)杂交证实该表达产物具有免疫原性。
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