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为制备新城疫病毒（NDV）中强毒株核酸检测阳性标准参考样品，本研究以NDV中强毒株RNA为模板，设计NDV融合蛋白F基因特异性引物，通过RT-PCR扩增全长F基因，克隆于pGEM-T载体中，采用体外转录方法制备RNA纯品，初步定量稀释后，混合分装作为核酸标准样品候选物。采用荧光定量RT-PCR方法进行均匀性和稳定性检验，并委托其他实验室采用外标定量RT-PCR方法对转录的RNA片段进行定值。通过绘制荧光定量标准扩增曲线计算标准物质含量（拷贝），并根据委托单位的定值结果进行不确定度的估算。均一性结果显示瓶间