【摘 要】
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[目的]气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)是一种嗅觉相关的蛋白,该蛋白参与大多数气味分子的识别过程,并与气味分子相结合.获得杨小舟蛾[Micromelalopha troglody
【机 构】
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南京林业大学,南方现代林业协同创新中心,南京林业大学林学院,江苏 南京 210037
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[目的]气味结合蛋白(odorant binding proteins,OBPs)是一种嗅觉相关的蛋白,该蛋白参与大多数气味分子的识别过程,并与气味分子相结合.获得杨小舟蛾[Micromelalopha troglodyta(Graeser)]OBPs以明确其特性.[方法]选择羽化后健康的杨小舟蛾触角为模板,通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术克隆杨小舟蛾MtroOBP1基因,利用生物信息学分析软件研究其基因序列和蛋白结构,运用实时荧光定量PCR(qPCR)技术研究MtroOBP1的组织表达模式.[结果]利用RT-PCR技术从杨小舟蛾触角总RNA中扩增得到MtroOBP1基因(GenBank登录号:MN056510),序列分析表明,MtroOBP1开放阅读框为777 bp,一共编码了258个氨基酸残基,且翻译的氨基酸序列仅含有4个保守的半胱氨酸位点,表明得到的OBP基因的编码蛋白不属于典型气味结合蛋白家族,而是属于Minus-C家族.蛋白质理化性质预测显示:MtroOBP1蛋白的分子量为29664.57 u,等电点为6.23,有18个潜在的磷酸化位点,没有明显的跨膜区,疏水指数为-2.011～3.078,有一个由19个氨基酸组成的信号肽,说明为分泌型蛋白.组织表达模式表明MtroOBP1在杨小舟蛾的各部位都表达,但在触角中表达量最高.[结论]首次克隆得到杨小舟蛾MtroOBP1基因,在触角中高表达,推测其蛋白具有运输气味分子的功能,在杨小舟蛾的嗅觉识别中起着至关重要的作用.
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