微量板培养中国仓鼠卵巢细胞检测百日咳毒素及抗毒素试验的标准化

来源 :国外医学.预防.诊断.治疗用生物制品分册 | 被引量 : 0次 | 上传用户:guoshun9231
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作者根据百日咳毒素可使中国仓鼠卵巢(CHO)细胞发生形态学改变这一现象,发展了一种简单的测定百日咳毒素及抗毒素滴度的方法,并将其标准化.毒素滴定直接在微量板中进行.每孔加入25μl经2倍稀释的毒素样品,将0.2ml培养基(含10,000个经胰蛋白酶消化的CHO细胞)加至每孔中,混匀后,将板置于含3.5%CO_2、湿度为98%的培养箱中37℃48小时,使全部细胞融合为1个细胞致病单位(CPU)为毒素滴定终点.百口咳毒素50~100pg/ml以上者在微量板上显示出CHO细胞最大数量融合;低于50~100pg/ml,仅部分融合;而未感染者则 Based on the observation that pertussis toxin causes morphological changes in Chinese hamster ovary (CHO) cells, a simple method for the determination of pertussis toxin and antitoxin titers has been developed and standardized, and the toxin titration is performed directly on the microplate .Add 25 μl of 2-fold diluted toxin sample to each well and add 0.2 ml of medium (containing 10,000 trypsinized CHO cells) to each well. After mixing, place the plate in a solution containing 3.5% CO 2, In a 98% incubator at 37 ° C for 48 hours, all cells were fused to a cell pathogenic unit (CPU) for the end of the toxin titration.50 to 100 pg / ml of 100 keratotoxin showed microcyst on CHO cells The maximum number of fusion; less than 50 ~ 100pg / ml, only partial fusion;
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