【摘 要】
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报道了一种粘性末端的限制性酶切片段的直接克隆和测序的方法.对限制性酶切片段的粘性末端先用T4 DNA聚合酶处理,变为平末端,然后用TaqTM DNA聚合酶在其3′末端加上A腺苷,即
【机 构】
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西北农林科技大学 农学院,澳大利亚默多克大学 西澳洲农业生物技术中心,澳大利亚西澳大学 地中海农业豆类研究中心
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报道了一种粘性末端的限制性酶切片段的直接克隆和测序的方法.对限制性酶切片段的粘性末端先用T4 DNA聚合酶处理,变为平末端,然后用TaqTM DNA聚合酶在其3′末端加上A腺苷,即可利用T/A克隆载体进行直接克隆测序.利用这种简单而快速的方法,对2个RFLP探针Psr680的限制性酶切片段(1.65 kb和0.65 kb)进行了测序,表明这种方法可以替代利用相应载体进行相应酶切等处理的粘性末端连接克隆测序的方法.
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