小鼠β防御素2、3融合基因载体构建及其抗流感病毒作用

• 作 者: 张强 李明远 丰锋 巩天祥 李婉宜 刘冯欢 冯艳 邝玉 王保
• 机 构: 四川大学华西基础医学与法医学院微生物学教研室,遂宁市第一人民医院内一科
• 出 处: 西部医学
• 发表日期: 2010年3期
• 关键词: Β防御素 甲型流感病毒 融合基因 重叠延伸PCR 免疫荧光 β-defensin Influenza A virus Fusion gene SOE-PCR I
• 基金项目: 基金项目：国家自然科学基金资助项目（No.30671964）

目的构建mBD2与mBD3融合基因的真核表达载体，检测其在MDCK细胞中的表达情况，并探讨其抗病毒特性。方法利用PCR方法分别扩增mBD2与mBD3基因片段，通过重叠延伸PCR技术（SOE—PCR）将mBD2与mBD3通过一段多肽接头Gly4Ser连接为融合基因mBD2与mBD3。将该融合基因插入真核表达载体pcDNA3．1（＋）获得重组质粒pcDNA3．1（＋）／mBD2-mBD3，经酶切、PCR及测序鉴定正确后，用脂质体转染MDCK细胞，通过免疫荧光检测融合蛋白表达情况，最后采用CCID50测定并分析