【摘 要】
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目的:探讨加味四君子汤对大鼠脑缺血再灌注(I/R)损伤后缺血侧海马区脑组织纤维蛋白-5(Fibulin-5),磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达及对神经细胞失巢凋亡的影响.方法 :将60只SPF
【机 构】
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湖南中医药大学中医诊断学湖南省重点实验室,长沙410208
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目的:探讨加味四君子汤对大鼠脑缺血再灌注(I/R)损伤后缺血侧海马区脑组织纤维蛋白-5(Fibulin-5),磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达及对神经细胞失巢凋亡的影响.方法 :将60只SPF级雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组、依达拉奉组(3.2 mg·kg-1),加味四君子汤高、中、低剂量组(19.08,9.54,4.77 g·kg-1).采用线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,7 d后处死大鼠,处死前进行神经功能缺损评分,采用苏木素-伊红(HE)染色进行组织病理学观察,原位末端标记法(TUNEL)染色检测神经细胞凋亡指数,免疫组化法和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测缺血侧海马区脑组织Fibulin-5及p-Akt蛋白表达情况.结果 :神经功能缺损评分结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠神经功能缺损评分显著升高(P＜0.01);与模型组比较,依达拉奉组、加味四君子汤高、中、低剂量组大鼠神经功能缺损评分均明显降低(P＜0.05,P＜0.01).免疫组化结果显示,与假手术组比较,模型组大鼠Fibulin-5,p-Akt蛋白表达,神经细胞凋亡指数均明显增高(P＜0.05,P＜0.01);与模型组比较,依达拉奉组、加味四君子汤高、中、低剂量组大鼠Fibulin-5,p-Akt蛋白表达均明显增加(P＜0.05,P＜0.01),神经细胞凋亡指数均明显降低(P＜0.05,P＜0.01).Western blot结果显示,与假手术组比较,模型组Fibulin-5,p-Akt蛋白相对表达显著下调(P＜0.01);与模型组比较,依达拉奉组、加味四君子汤高、中、低剂量组Fibulin-5,p-Akt蛋白表达均明显上升(P＜0.05,P＜0.01).结论 :加味四君子汤可能通过稳定神经元细胞外基质(ECM)Fibulin-5,从而增加了ECM对细胞的黏附作用,促进p-Akt蛋白的表达,从而抑制神经细胞凋亡,保护脑缺血损伤.
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