【摘 要】
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以大豆根际土壤为研究对象,采用湿筛倾析-蔗糖离心法分离大豆根际土壤真菌孢子。应用Nested-PCR技术扩增其28S rDNA D1/D2区域,并结合DNA测序、系统发育分析,对其进行分类鉴
【机 构】
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黑龙江东方学院食品与环境工程学部,黑龙江大学生命科学学院分子生物学重点实验室,东北林业大学生命科学学院,
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以大豆根际土壤为研究对象,采用湿筛倾析-蔗糖离心法分离大豆根际土壤真菌孢子。应用Nested-PCR技术扩增其28S rDNA D1/D2区域,并结合DNA测序、系统发育分析,对其进行分类鉴定。结果表明:筛选出的大豆根际土壤真菌孢子DT-1与土壤真菌(AB438763)有较高的序列同源性,为97%;DT-2与Mucor racemosus(Y213713)有较高的序列同源性,为99%。此方法适用于大豆根际土壤真菌的鉴定,并且能够快速准确地得到试验结果。
Taking soybean rhizosphere soil as the research object, the fungal spores of soya rhizosphere soil were isolated by wet sieving decantation-sucrose centrifugation. The 28S rDNA D1 / D2 region was amplified by Nested-PCR. The DNA was sequenced and phylogenetically analyzed. The results showed that there was a high sequence homology of 97% in soil rhizosphere soil DT-1 and soil fungi (AB438763), and DT-2 and Mucor racemosus (Y213713) had higher sequence homology Sex, is 99%. This method is suitable for the identification of soya rhizosphere soil fungi, and can quickly and accurately get the test results.
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