【摘 要】
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目的 探讨曲古抑菌素A(TSA)对ER-α阳性和ER-α阴性乳腺癌细胞系的作用机制.方法 以含不同浓度TSA的培养液培养MCF-7(ER-α阳性)和MDA-MB-231细胞(ER-α阴性);采用四甲基亚噻
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目的 探讨曲古抑菌素A(TSA)对ER-α阳性和ER-α阴性乳腺癌细胞系的作用机制.方法 以含不同浓度TSA的培养液培养MCF-7(ER-α阳性)和MDA-MB-231细胞(ER-α阴性);采用四甲基亚噻唑蓝(MTT)法检测TSA作用后肿瘤细胞的增殖状态;用流式细胞仪定量分析肿瘤细胞增殖周期的改变;用半定量RT-PCR法测定ER-α和cyclin D1mRNA的表达.Western blot检测ER-α、p21和细胞周期素cyclin D1的蛋白表达水平.结果 ER-α阳性的MCF-7细胞对TSA的敏感性明显高于ER-α阴性的MDA-MB-231细胞,TSA作用48 h时前者的IC50约为40.6 nmol/L,后者的IC50约为272.4 nmol/L.在MCF-7 细胞系中,TSA能有效抑制ER-α和cyclin D1mRNA的表达,并增强cyclin D1蛋白通过泛素-蛋白酶体通路降解,使肿瘤细胞主要阻滞在G0/G1和G2/M期.在MDA-MB-231细胞系中,TSA对cyclin D1蛋白通过泛素-蛋白酶体通路降解作用增强,但对其mRNA转录本表达无明显影响.结论 TSA不仅可以通过依赖ER-α途径抑制cyclin D1 mRNA的表达,也可通过增强泛素-蛋白酶体通路降解cyclin D1蛋白而不依赖于雌激素途径.
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