探讨褪黑素对微小RNA-9(miRNA，miR-9)的表达影响及减轻脓毒症炎性反应的作用机制。
方法制备脓毒症小鼠模型，随机分为：模型组[脂多糖(LPS)组]，褪黑素治疗组(Mel＋LPS组)，分别于注射LPS前0.5 h、中、后4 h注射褪黑素(30 mg/kg)(Mel＋LPS组)或等比例生理盐水(LPS组)。24 h后处死半数小鼠，收集其血液，48 h后处死其余小鼠，收集肝、肺组织。苏木精-伊红(HE)染色观察脏器病理损伤，酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β含量，实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测肺、肝组织miR-9含量。培养RAW264.7细胞，随机分为：miR-9抑制物对照组(NC组)，miR-9抑制物组(miR-9-in组)，LPS＋miR-9抑制物对照组(LPS＋NC组)和LPS＋miR-9抑制物组(LPS＋miR-9-in组)。FQ-PCR法检测TNF-α、IL-1β的mRNA表达水平；蛋白质印迹法(Western blot)检测p65、磷酸化p65的蛋白含量。
结果HE染色显示，LPS组脏器损伤严重，大量炎性细胞浸润。Mel＋LPS组脏器损伤程度较LPS组明显改善。Mel＋LPS组TNF-α、IL-1β显著低于LPS组[TNF-α：(93.17±21.92) ng/L比(236.83±24.86) ng/L；IL-1β：(97.07±14.62) ng/L比(159.63±28.83) ng/L，P<0.01]。Mel＋LPS组肺、肝组织miR-9的表达水平显著低于LPS组(肺：0.61±0.12比2.36±0.13；肝：0.62±0.19比2.85±0.57，P<0.01)。巨噬细胞模型中，LPS＋miR-9-in组TNF-α、IL-1β的mRNA表达水平显著低于LPS＋NC组(TNF-α：21.92±3.67比42.94±8.88；IL-1β：351.55±71.89比645.00±55.02，P<0.01)，蛋白印迹实验检测结果显示LPS＋miR-9-in组磷酸化p65的蛋白表达水平显著低于LPS＋NC组(0.14±0.05比0.67±0.11，P<0.01)。
结论褪黑素可能通过抑制miR-9的表达来抑制核因子-κB通路的激活，从而减轻脓毒症中的炎性反应，减轻器官功能损伤。