探讨微小RNA(miRNA，miR)-4287对人软骨细胞聚蛋白多糖酶-2(ADAMTS5)的调控作用及其机制。
方法从膝关节软骨组织中分离得到软骨细胞，白细胞介素(IL)-1β诱导软骨炎症模型，过表达或抑制细胞中miR-4287水平，实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)及蛋白质印迹法(Western blot)分析miR-4287和ADAMTS5 mRNA及蛋白表达，双荧光素酶报告基因方法验证miR-4287与ADAMTS5 mRNA 3’非翻译区(UTR)的结合效应。
结果miR-4287在人骨关节炎(OA)软骨组织中表达较正常软骨组织减少(0.354±0.167比1.074±0.507；t＝3.010，P<0.05)，而ADAMTS5 mRNA表达升高(21.019±7.044比1.902±2.081；t＝－5.820，P<0.01)。与未刺激组比较，IL-1β刺激软骨细胞12 h后，miR-4287表达降低(0.454±0.095比1.010±0.166；t＝11.410，P<0.01)，而ADAMTS5 mRNA表达增多(5.067±0.994比1.006±0.137；t＝7.306，P<0.05)。转染miR-4287模拟物48 h后，软骨细胞内ADAMTS5 RNA(0.620±0.366比1.023±0.269；t＝6.047，P<0.05)和蛋白表达均降低；而转染miR-4287抑制剂后，软骨细胞内ADAMTS5 RNA(2.502±0.625比1.018±0.226；t＝5.637，P<0.05)和蛋白表达均升高。结合位点为野生型时，过表达miR-4287能降低报告载体的荧光素酶活性(0.789±0.088比1.018±0.226；t＝2.806，P<0.05)；结合位点突变后，过表达miR-4287能则不能改变报告载体的荧光素酶活性(1.000±0.006比1.014±0.065；t＝0.364，P>0.05)。
结论miR-4287是人软骨细胞ADAMTS5表达的直接调控因子，可能在软骨基质代谢稳态维持方面具有重要的作用。