水螅致畸危害测试方法中体外代谢活化系统的建立

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本文介绍水螅测试系统(Hydra Assay)中大鼠肝微粒体混合功能氧化酶(MFO)体外代谢活化体系的建立方法。其组成为0.06nmol P-450/ml,500μM NADPH,25μM MgCL_2。生化和生物测试结果均证明了这一体外代谢活化体系在水螅实验条件(20℃,pH7.0)下对前致畸原环磷酰胺的代谢活化能力。与未加代谢活化体系的水螅测试结果比较,加入代谢活化体系后环磷酰胺对水螅成体和胚胎的毒性分别增加了200倍和250倍。 This article describes the establishment of in vitro metabolic activation system of rat liver microsomal mixed-function oxidase (MFO) in Hydra Assay. The composition was 0.06 nmol P-450 / ml, 500 μM NADPH, 25 μM MgCl_2. The biochemical and biological test results all demonstrate the metabolic activation of the pre-teratogenic cyclophosphamide in this in vitro metabolic activation system under hydration conditions (20 ° C, pH 7.0). Compared with the results of hydatid water without metabolic activation system, the toxicities of cyclophosphamide to adult and embryonic hydatid were increased by 200-fold and 250-fold respectively after adding metabolic activation system.
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