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目的：构建肺炎克雷伯菌cAMP受体蛋白基因（crp基因）缺失突变株与回补株，了解crp基因在肺炎克雷伯菌生物膜形成中的作用。方法设计位于crp基因（566 bp）上游698 bp片段及下游576 bp片段的两对引物，分别扩增出相应片段并通过融合PCR构建一个1274 bp片段的突变盒，利用双酶切克隆的方法将突变盒克隆至温度敏感性自杀载体pKO3-Km的NotⅠ位点间，电转化至肺炎克雷伯菌中构建肺炎克雷伯菌crp基因无痕缺失突变株（Δcrp）。扩增包含crp基因编码、启动子结合区及转录终止区的2063 bp