口蹄疫病毒VPg2基因克隆表达及VPg2-ELISA检测抗体评价

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成功亚克隆了口蹄疫病毒(FMDV)太保毒株3ABC中VPg2基因,并将其插入pGEX-4T-1表达载体构建重组表达质粒,Western blotting分析表明,表达的VPg2蛋白与FMDV阳性血清发生反应.以VPg2表达蛋白为抗原建立间接ELISA方法,对背景清楚的试验牛血清进行检测,结果VPg2表达蛋白与空白对照组(C组)和灭活疫苗反复免疫组(CⅠ组)牛血清均不发生反应,与未免疫直接攻毒组(D组)和免疫后攻毒组(Ⅰ组)血清均发生反应;对D组和Ⅰ组,VPg2表达蛋白抗体持续时间最长,可达90d,最早呈阳性反应时间为攻毒后第10天.VPg2表达蛋白抗体持续时间与先前测定的3ABC表达蛋白抗体几乎相同.用VPg2-ELISA方法检测2 170份进口阴性牛血清,12份出现假阳性,假阳性率为0.55%,而用3ABC-ELISA方法检测,48份出现假阳性,假阳性率为2.21%.
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