【摘 要】
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目的旨在构建一种良好性能的壳聚糖-人骨形态发生蛋白(BMP)-2纳米粒基因载体。方法通过复凝聚法制备的壳聚糖纳米粒与基因重组构建的BMP-2质粒相结合,形成含50、100和200μg/
【机 构】
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浙江省杭州哼哈口腔医院修复科; 浙江大学医学院附属口腔医院修复科; 四川大学华西口腔医院修复科;
【基金项目】
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浙江省教育厅基金(N20080180,N20110143);浙江省自然科学基金(Y2080340)资助
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目的旨在构建一种良好性能的壳聚糖-人骨形态发生蛋白(BMP)-2纳米粒基因载体。方法通过复凝聚法制备的壳聚糖纳米粒与基因重组构建的BMP-2质粒相结合,形成含50、100和200μg/mL质粒BMP-2的壳聚糖纳米粒基因载体(分别命名为C-B50、C-B100和C-B200)。采用包封率测定壳聚糖与BMP-2目的基因的结合情况,场发射扫描电子显微镜观察纳米粒的形态和大小,DNaseⅠ消化实验检测该基因载体对目的基因的保护作用,以及MTT试验检测基因载体对骨髓基质干细胞的生长抑制。结果壳聚糖-BMP-2纳米粒基因载体呈不规则球形,结构紧密,粒径约为(90±20)nm。C-B50、C-B100和C-B200的包封率分别为76.31%±1.58%、84.49%±1.81%和81.69%±1.77%。壳聚糖-BMP-2纳米粒基因载体有效地保护BMP-2目的基因不被DNaseⅠ消化,随着剂量和时间的增加,对细胞的生长抑制率也增加(P<0.05),但最大剂量100 mg/L作用后绝大部分细胞的正常生长没有受到明显影响。结论该壳聚糖-BMP-2纳米粒基因载体有望应用于骨组织工程。
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