【摘 要】
：
目的探讨不同浓度DNA甲基化抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷对母系表达基因3(MEG3)基因启动子超甲基化的逆转作用，以及恢复MEG3表达对上皮性卵巢癌细胞增殖活性的影响。方法以0、1、5、10、20 μmol/L的5-氮杂-2-脱氧胞苷作用上皮性卵巢癌OVCAR3细胞6 d后，采用甲基化特异性PCR(MSP)检测MEG3启动子的甲基化状态，逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测MEG3 mRNA的表
【机 构】
：
510150 广州医科大学附属第三医院妇科 广东省产科重大疾病重点实验室 广东省普通高校生殖与遗传重点实验室,510150 广州医科大学附属第三医院妇科 广东省产科重大疾病重点实验室 广东省普通高校生
论文部分内容阅读
目的探讨不同浓度DNA甲基化抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷对母系表达基因3(MEG3)基因启动子超甲基化的逆转作用，以及恢复MEG3表达对上皮性卵巢癌细胞增殖活性的影响。
方法以0、1、5、10、20 μmol/L的5-氮杂-2-脱氧胞苷作用上皮性卵巢癌OVCAR3细胞6 d后，采用甲基化特异性PCR(MSP)检测MEG3启动子的甲基化状态，逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测MEG3 mRNA的表达水平，采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法和5-乙炔基-2'-脱氧尿嘧啶核苷(EdU)掺入实验检测细胞增殖活性的变化。
结果MSP检测显示，0 μmol/L 5-氮杂-2-脱氧胞苷组(对照组)、1 μmol/L 5-氮杂-2-脱氧胞苷组、5 μmol/L 5-氮杂-2-脱氧胞苷组、10 μmol/L 5-氮杂-2-脱氧胞苷组和20 μmol/L 5-氮杂-2-脱氧胞苷组的甲基化水平分别为1.00±0.00、0.79±0.00、0.67±0.00、0.65±0.03和0.61±0.01，各组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。RT-PCR检测显示，对照组、1 μmol/L 5-氮杂-2-脱氧胞苷组、5 μmol/L 5-氮杂-2-脱氧胞苷组、10 μmol/L 5-氮杂-2-脱氧胞苷组和20 μmol/L 5-氮杂-2-脱氧胞苷组MEG3 mRNA的相对表达水平分别为1.00±0.00、2.04±0.16、2.44±0.17、3.19±0.34和5.34±0.39，各组间差异均有统计学意义(均P<0.05)。MTT比色法检测显示，与对照组比较，1 μmol/L 5-氮杂-2-脱氧胞苷组、5 μmol/L 5-氮杂-2-脱氧胞苷组、10 μmol/L 5-氮杂-2-脱氧胞苷组和20 μmol/L 5-氮杂-2-脱氧胞苷组OVCAR3细胞的增殖活性受到明显抑制，5-氮杂-2-脱氧胞苷作用2、4、6 d时，各组间细胞抑制率差异均有统计学意义(均P<0.01)。EdU掺入实验显示，对照组、1 μmol/L 5-氮杂-2-脱氧胞苷组、5 μmol/L 5-氮杂-2-脱氧胞苷组、10 μmol/L 5-氮杂-2-脱氧胞苷组和20 μmol/L 5-氮杂-2-脱氧胞苷组OVCAR3细胞中的EdU阳性细胞率分别为(40.78±0.80)%、(35.65±0.33)%、(31.81±0.66)%、(27.33±1.27)%和(17.75±1.85)%，差异均有统计学意义(均P<0.01)。
结论5-氮杂-2-脱氧胞苷可逆转上皮性卵巢癌细胞抑癌基因MEG3启动子超甲基化状态，进而使MEG3重新表达，从而参与了抑制卵巢癌细胞的增殖活性。
其他文献
目的 总结老年转子部骨折手术治疗的临床经验,提高老年转子部骨折的手术治疗水平.方法手术治疗老年转子部骨折58例,平均69岁,96%合并内科疾患,进行了围手术期治疗.应用外固定架固定9例,股骨重建钉固定12例,动力髋螺钉固定37例.结果无1例发生骨折愈合前死亡,功能优良率外固定架治疗组88.9%,股骨重建钉治疗组100%,髋动力螺钉治疗组94.6%.结论正确的围手术期处理是老年转子部骨折手术治疗的安
目的 研究WO-1生物衍生骨复合材料与兔成骨细胞的相容性及体外附着规律,为进一步的体内试验提供基础研究.方法应用同种异体骨、Ⅰ型胶原及WO-1制备WO-1生物衍生骨复合材料;取幼兔的颅顶骨成骨细胞,经培养液体外培养、扩增后,与WO-1生物衍生骨材料联合培养.通过扫描电镜和倒置相差显微镜观察WO-1生物衍生骨复合材料的形貌特征、细胞与材料的粘附和增殖情况.结果WO-1生物衍生骨复合材料具有天然骨的三
第5届亚太地区手外科学术大会(The 5th Congress of the Asian Pacific Federation of Societies for the Hand)于2004年11月12～15日在日本大阪市国际交流中心召开。学术大会由亚太地区手外科联合会(The Asian Pacific Federation of Societies for Surgery of the Han
目的 利用藻酸盐微球体外培养兔耳弹性软骨细胞,观察IGF-1和bFGF对细胞增殖和基质合成的影响及协同作用效果.方法酶消化法从兔耳获取软骨细胞,与1.2%藻酸钠混合,细胞浓度107/mL,经注射器滴入102mM的CaCl2溶液,形成软骨细胞/藻酸钙凝胶微球,用含10%FBS的DMEM培养液体外培养,对照组不加生长因子,实验A、B和C组分别加入25ng/mLIGF-1、50ng/mL bFGF和25
目的探讨肺癌肿瘤抑制因子1(TSLC1)基因甲基化、TSLC1蛋白表达和高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)感染在宫颈癌前病变及宫颈癌中的意义。方法收集2011年3月至2012年8月间收治的92例不同宫颈病变患者，经病理证实为正常宫颈10例，宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ级26例，CIN Ⅱ级20例，CIN Ⅲ级15例，宫颈癌21例。用甲基化特异性聚合酶链反应法(MSP)检测不同宫颈病变组织中TSLC1
目的探讨颅底骨肉瘤的临床特点和治疗方法。方法回顾性分析2005年1月至2013年11月间收治的18例颅底骨肉瘤患者的临床资料，通过电话、门诊复查等方式随访。15例患者获得随访，其中4例行单纯手术治疗，11例行手术治疗及辅助放化疗。生存分析采用Kaplan–Meier法和Log rank检验。结果15例获得随访的患者中，死亡9例，其中死于局部复发7例，死于远处转移2例，生存6例。4例单纯手术患者的中
目的观察舒尼替尼服药2周、停药1周方案(2/1方案)一线治疗转移性肾细胞癌患者的疗效及安全性。方法经病理证实的11例转移性肾透明细胞癌患者采用舒尼替尼2/1方案治疗，即舒尼替尼50 mg、 1次/d，服药2周，停药1周，每6周为1个周期，持续使用至疾病进展或不良反应不能耐受。主要观察终点为无进展生存时间(PFS)，次要终点为总生存时间(OS)、不良反应及客观缓解率。结果11例患者中，部分缓解5例，
目的分析17例腮腺肌上皮癌的的临床特点、诊治情况及预后。方法对1999年至2013年收治的17例腮腺肌上皮癌患者进行回顾性分析。17例患者中，9例行单纯手术治疗，5例行术后放疗，2例行术前放疗，1例行化疗。应用Kaplan–Meier法计算患者的生存率。结果17例患者中，术后复发11例，复发率为64.7%。在复发的11例患者中，有5例(45.5%)患者在初次手术1年内复发。随访期间，死亡6例，其中
目的通过增加B细胞异位基因2(BTG2)蛋白表达水平的方法，抑制结肠癌细胞的增殖和转移。方法采用Western blot法检测正常人肠上皮细胞HIEC和结肠癌细胞SW620、HT–29、LS174T中BTG2蛋白的表达水平。采用免疫组织化学方法检测40例正常结肠上皮、40例结肠腺瘤和40例结肠癌组织中BTG2蛋白的表达情况。将含BTG2基因全长序列的质粒转染结肠癌SW620细胞，采用四甲基偶氮唑蓝
目的探讨能谱CT在鉴别淋巴瘤、头颈部鳞状细胞癌(SCC)和甲状腺乳头状癌(PTC)转移淋巴结中的应用价值。方法分析2014年1月至6月非霍奇金淋巴瘤(NHL) 25例共236枚淋巴结、霍奇金淋巴瘤(HL) 3例共32枚淋巴结、SCC 21例共86枚淋巴结和PTC 19例共92枚淋巴结。记录40～140 keV能量区段所对应的CT值及碘基图和水基图各枚淋巴结的碘和水含量，分别测量不同keV下淋巴结的