【摘 要】
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PCR-单链构象多态性技术(SSCP)问世以来,成为研究基因突变的工具。特别是在分子肿瘤学研究中,广泛应用于癌基因、抑癌基因突变的研究。常规PCR-SSCP采用同位素标记PCR产物,测序板电泳分离突变,在操作和
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PCR-单链构象多态性技术(SSCP)问世以来,成为研究基因突变的工具。特别是在分子肿瘤学研究中,广泛应用于癌基因、抑癌基因突变的研究。常规PCR-SSCP采用同位素标记PCR产物,测序板电泳分离突变,在操作和费用上有种种局限,文章建立了一种非同位素PCR-SSCP技术:通过不对称PCR获得单链,普通PAGE分离,经银染检出突变。用这种方法,还研究了四株鼻咽癌细胞株CNE1,CNE2,HK1和SUNE1中肿瘤抑制基因p53基因突变。证实CNE1,CNE2在exon8,HK1在exon5有突变,并发现新建立的细胞株SUNE1在exon8有突变。
Since the advent of PCR-single-strand conformation polymorphism (SSCP), it has become a tool for studying gene mutations. Especially in molecular oncology research, widely used in cancer gene, tumor suppressor gene mutation research. Conventional PCR-SSCP using isotope-labeled PCR products, sequenced plate electrophoresis separation of mutations, there are various limitations in the operation and cost, the article established a non-isotope PCR-SSCP technology: asymmetric PCR obtained single-stranded, ordinary PAGE separation, Silver stain detected mutation. In this way, p53 gene mutations of tumor suppressor genes in four nasopharyngeal carcinoma cell lines CNE1, CNE2, HK1 and SUNE1 were also studied. It was confirmed that CNE1 and CNE2 have mutations in exon8 and HK1 in exon5 and found that the newly established cell line SUNE1 has a mutation in exon8.
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