基于狂犬病病毒重组蛋白的ELISA检测方法比较研究

• 作 者: 程朝飞 宫苗苗 田康乐 王勇 赵占中 史利军 李刚
• 机 构: 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物营养学国家重点实验室,中国农业大学动物医学院
• 出 处: 畜牧兽医学报
• 发表日期: 2012年12期
• 关键词: 狂犬病病毒 基质蛋白M 原核表达 间接ELISA 磷蛋白P rabies virus matrix protein prokaryotic expressio
• 基金项目: 基金项目：国家高技术研究发展计划（863计划）（2008AA102411）,北京市科委项目（Z07010501780701）,国家公益行业项目（20083014,200903037-2）

原核表达狂犬病病毒的基质蛋白（M），并以此作为包被抗原建立间接ELISA检测方法，与以狂犬病病毒磷蛋白（P）作为包被抗原建立的间接ELISA方法进行比较。根据GenBank中公布的狂犬病病毒LEP—Flury株M基因序列设计特异性引物并引入SmaI和NotI酶切位点，经RT—PCR扩增得到目的基因，连接pCR2．1载体，构建重组质粒pCR_Rv_M，重组质粒用SmaI和NotI进行双酶切，酶切产物定向克隆至原核表达载体pGEX-6P-1中，构建重组表达载体pGEX-RV-M。将重组表达载体转化E．coli