【摘 要】
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应用血清多肽SPGO1、SPG03、SPG04的多抗(PcAb)酶联免疫吸附方法(ELISA),用于鼻咽癌放疗敏感性的检测.以碳二亚胺偶联法制备多肽免疫抗原,免疫动物制备兔血清多抗,用Protein
【机 构】
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北京蛋白质组研究中心,蛋白质组学国家重点实验室,国家蛋白质科学中心(北京),北京102206;军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京100850;中南大学药学院,湖南长沙410013;中山大学肿瘤防
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应用血清多肽SPGO1、SPG03、SPG04的多抗(PcAb)酶联免疫吸附方法(ELISA),用于鼻咽癌放疗敏感性的检测.以碳二亚胺偶联法制备多肽免疫抗原,免疫动物制备兔血清多抗,用Protein A亲和层析法纯化多抗,选择3种多抗的工作滴度,应用多抗ELISA法检测63份鼻咽癌血清样本.紫外(UV)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)联合监测表明多肽偶联到BSA(牛血清白蛋白)上;动物免疫获得3种兔血清多克隆抗体各40 mL;纯化后的多抗纯度在90％以上,效价均在1:100 000以上;3种多抗的检测滴度分别为1:20000,1:100000,1:10 000;间接ELISA最低检测限为0.03 μg/mL,相对标准偏差(RSD)为5.6％.t检验分析3种多肽区分鼻咽癌放疗敏感组与不敏感组,均呈显著差异(P ＜0.000 1).ROC曲线表明,3种多肽检测鼻咽癌放疗敏感性的特异性在90％以上,灵敏度为73％～93％.3种多肽标志物均能显著区分鼻咽癌放疗敏感组与不敏感组,所应用的多抗ELISA方法检测鼻咽癌放疗敏感性特异性好,灵敏度高,可用于鼻咽癌个体化治疗的放疗敏感性辅助诊断.
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