细丝蛋白A对肝癌细胞恶性生物学行为的影响及其在原发性肝癌中的表达及其临床意义

• 作 者: 闫宏宪 刘海潮 刘少朋 白明辉 郑幼伟
• 机 构: 郑州大学附属洛阳中心医院肝胆胰脾及疝外科 471000,郑州大学附属洛阳中心医院肝胆胰脾及疝外科 471000,郑州大学附属洛阳中心医院肝胆胰脾及疝外科 471000,郑州大学附属洛阳中心医院肝胆胰脾
• 出 处: 中华实验外科杂志
• 发表日期: 2021年38期
• 关键词: 肝细胞癌 细丝蛋白A 细胞增殖 侵袭

目的

观察细丝蛋白A(FLNa)在人原发性肝细胞癌中的表达，探究其对肝癌细胞恶性生物学行为的影响。

方法

采用免疫组织化学法及实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测70例原发性肝癌及对应癌旁组织中FLNa表达，分析其与患者临床病理特征及预后间的相关性；RT-qPCR法检测不同肝癌细胞株(SMMC-7721、HepG2、HCCLM3、Huh7、PLC/PRF/5、Hep3B)与正常肝脏细胞株HL-7702中FLNa mRNA表达。慢病毒转染法构建过表达FLNa的Hep3B细胞株，RT-qPCR检测转染；噻唑蓝(MTT)法、平板克隆实验、Transwell实验检测细胞增殖、克隆及侵袭迁移能力变化；蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞外调节蛋白激酶2(ERK2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、磷酸化p38丝裂原活化蛋白酶(p-p38MAPK)表达，采用单因素方差分析、χ²检验、LSD-t检验或秩和检验对上述所得数据进行统计分析。

结果

肝癌组织中FLNa阳性表达率低于癌旁组织(14.3%比81.4%，χ²＝9.725，P<0.05)，FLNa在肝癌组织中表达水平明显低于癌旁正常组织(3.13±1.02比22.01±2.38，t＝6.520，P<0.05)，其表达与肿瘤大小、TNM分期、肿瘤分化程度、脉管浸润及淋巴结转移有关(χ²_肿瘤大小＝6.400，χ²_分化程度＝10.850，χ²_脉管浸润＝4.055，χ²_{淋巴结转移}＝7.256，均P<0.05)，但与性别、年龄、肿瘤部位及AFP水平无明显相关(χ²_性别＝0.000，χ²_年龄＝0.010，χ²_肿瘤部位＝0.038，χ²_AFP＝3.276，均P>0.05)。FLNa阳性表达患者中位生存期显著高于阴性表达者(23.3个月比10.3个月，P<0.05)。各肝癌细胞株中FLNa表达量均低于HL-7702细胞株(1.95±0.45、1.90±0.58、1.89±0.72、1.99±0.10、1.90±0.49、1.81±0.17比14.08±2.52，F_SMMC-7721＝4.120，F_HepG2＝4.774，F_HCCLM3＝4.655，F_Huh7＝4.987，F_PLC/PRF/5＝3.735，F_Hep3B＝5.094，均P<0.05)。过表达FLNa的Hep3B细胞增殖、克隆及侵袭迁移能力显著降低，ERK2、MMP-9、p-p38MAPK表达明显下降(均P<0.05)。

结论

FLNa在人原发性肝癌中低表达，过表达FLNa可通过抑制MAPK/ERK信号通路活化而抑制肝癌细胞恶性生物学行为。