【摘 要】
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目的 探讨肝X受体(LXR)负性调控大鼠枯否细胞(KCs)中Toll样受体4(TLR4)通路对移植肝脏缺血再灌注损伤的影响.方法 密度梯度离心法分离培养SD大鼠肝脏KCs,将获得的细胞随机分
【机 构】
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重庆医科大学附属第二医院肝胆外科,重庆 400010;重庆医科大学附属第一医院肝胆外科,重庆400016
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目的 探讨肝X受体(LXR)负性调控大鼠枯否细胞(KCs)中Toll样受体4(TLR4)通路对移植肝脏缺血再灌注损伤的影响.方法 密度梯度离心法分离培养SD大鼠肝脏KCs,将获得的细胞随机分为脂多糖(LPS)组、LPS+GW3965组、LPS+LXR拮抗剂组.动物实验选用雄性SD大鼠96只,随机分为GW3965预处理组(GW3965 0.3 mg·kg-1于手术前30 min经尾静脉注射处理供体)、生理盐水对照组(给予等体积生理盐水).两组均采用改进的Kamada两袖套法进行肝移植.Western blot测定各组细胞、移植物中白细胞介素-1受体相关激酶4(IRAK-4)、干扰素调节因子-3 (IRF3)蛋白表达,EMSA测定各组细胞NF-κB的相对活性,酶联免疫吸附法检测KCs培养上清液肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素β(IFN-β),于移植肝脏再灌注后3、6、24 h测定血清丙氨酸转氨酶(ALT),光镜观察肝脏组织的形态学变化.结果 IRAK-4和IRF3蛋白表达、NF-κB相对活性、TNF-α和IFN-β水平在LPS+LXR拮抗剂组最高,而在LPS+GW3965组最低(均P＜0.05).GW3965预处理组各时间点组织的IRAK-4和IRF3蛋白表达量以及血清ALT活性明显低于对照组(P＜0.05),GW3965预处理组各时间点肝组织的损伤均明显轻于对照组(P＜0.05).结论 激活LXRs能负性调控KCs中TLR4信号通路的IRAK-4、IRF3的蛋白表达,抑制NF-κB的活化和炎症因子的释放,可减轻肝移植缺血再灌注损伤.
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