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目的 观察小鼠巨噬细胞炎性蛋白1α (macrophage inflammatory protein 1α,MIP-1α)基因佐剂对不可分型流感嗜血杆菌(nontypeable Haemophilus influenzae,NTHi)外膜蛋白P6(outer membrane protein P6,P6) DNA疫苗免疫效果的影响.方法 将92只BALB/c小鼠随机分为4组,分别用pcDNA3.1、pcDNA3.1/MIP-1α、pcDNA3.1/P6和pcDNA3.1/MIP 1α+pcDNA3.1/P6,肌肉注射免疫,每2周免疫1次,共3次,质粒每次每只接种100 μg.末次免疫后14 d,每组取10只小鼠,采血,分离血清,采用ELISA法检测特异性IgG抗体;每组取3只小鼠,制备脾淋巴细胞,采用CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖活性,采用ELISA法检测小鼠脾淋巴细胞分泌IL-4和IFN-γ水平.用8LD50NTHi攻击每组剩余10只小鼠,观察免疫保护作用.结果 末次免疫后,pcDNA3.1/MIP-1α+pcDNA3.1/P6组小鼠脾淋巴细胞分泌IFN-γ水平为(1726.45±184.48) ng/L,增殖指数2.06±0.04,与pcDNA3.1/P6组(1443.09±187.70)ng/L和1.90±0.04比较差异均有统计学意义(P＜0.05);抗体滴度和IL-4水平两组间差异无统计学意义(P＞0.05).经NTHi攻击后,pcDNA3.1/MIP 1α+pcDNA3.1/P6免疫组小鼠14d生存率达70％,与pcDNA3.1组0％和pcDNA3.1/MIP-1α组0％相比与差异有统计学意义(P＜0.05),与pcDNA3.1/P6组60％相比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 MIP-1α基因佐剂在一定程度上能增强NTHi P6基因疫苗的免疫保护作用.