【摘 要】
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目的:探讨小檗碱(BBR)调控NLRP3炎症小体对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化的影响.方法:计算机分子对接预测BBR与NLRP3炎症小体的结合情况;采用C
【机 构】
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三峡大学人民医院宜昌市第一人民医院药学部 湖北宜昌443000;三峡大学医学院;三峡大学医学院;三峡大学人民医院宜昌市第一人民医院药学部 湖北宜昌443000
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目的:探讨小檗碱(BBR)调控NLRP3炎症小体对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化的影响.方法:计算机分子对接预测BBR与NLRP3炎症小体的结合情况;采用CCK8法检测不同浓度的BBR对HK-2细胞增殖的影响;将HK-2细胞分为正常组、模型组和小檗碱低、中、高剂量组(10,25,50 μmol·L-1),小檗碱预孵18h后加入TGF-β1刺激48 h,镜下观察各组细胞形态;采用Western blotting法检测E-钙粘蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)的表达;caspase-1活性检测试剂盒检测caspase-1的酶活力;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测细胞上清液中白细胞介素-1β(IL-1β)的含量.结果:分子对接显示BBR与NL-RP3、pro-caspase-1存在结合,可靠性较高.与正常组比较,BBR对HK-2细胞的增殖呈浓度和时间依赖性抑制(P＜0.05).与模型组比较,BBR(10,25,50 μmol·L-1)可改善HK-2细胞形态,使其趋向椭圆形;上调E-cadherin蛋白和下调α-SMA、NLRP3及caspase-1蛋白的表达(P＜0.05);并可降低caspase-1的薛活力、减少IL-1β的分泌(P＜0.05).结论:BBR能改善TGF-β1诱导HK-2细胞的转分化,可能与抑制NLRP3炎症小体活化有关.
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