解淀粉芽孢杆菌草酸脱羧酶基因的克隆、原核表达与活力测定

来源 :江苏农业科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kumufengchun
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  摘要:为进一步明确解淀粉芽孢杆菌C(10)的草酸脱羧酶基因的生物功能,克隆其关键基因对该基因进行原核表达。通过PCR技术克隆了淀粉芽孢杆菌C(10)的草酸脱羧酶基因,构建了原核生物表达载体pET28a-Baoxdc,对其进行表达与纯化。结果表明,扩增所获解淀粉芽孢杆菌C(10)的草酸脱羧酶全基因序列全长为1 161 bp,在大肠杆菌中进行表达,添加诱导剂IPTG、MnCl2至终浓度分别为0.6、6 mmol/L,诱导4 h时的酶活力和比活力最高,分别为3.793 2 U/mL和3.145 3 U/mg。
   关键词:解淀粉芽孢杆菌;草酸脱羧酶;克隆;原核表达;酶活测定
   中图分类号: Q786;S188
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