小鼠Toll样受体3基因的克隆及真核表达

• 作 者: 彭丽娜 李力 邱亚峰 缪剑华 王晓杜 徐永莉 史子学 邵东华
• 机 构: 中国农业科学院上海兽医研究所,广西壮族自治区药用植物园
• 出 处: 生物技术通报
• 发表日期: 2011年6期
• 关键词: TLR3 NF-ΚB 基因表达 信号转导 TLR3 NF-κB Gene expression Signal transduetion
• 基金项目: 广西自然科学基金重点项目（桂科自08320152）

采用RT．PCR方法从小鼠巨噬细胞中克隆小鼠Toil样受体3（TLR3）基因，基因测序表明获得了小鼠全长TLR3cDNA，构建了真核表达质粒p3XFLAG—CMV-7．1-TLR3。重组质粒转染293T细胞，Western blotting检测蛋白表达，表达蛋白质的相对分子量与预计相符。采用TLR3的阳性刺激物poly（I：C）刺激重组质粒转染的293T细胞，双荧光素酶报告基因系统检测发现能激活下游转录因子NF-κB的转录活性，并能诱导TLR3下游细胞因子IL-6和TNF-α的表达。小鼠TLR3基因的克隆