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摘要：目的：本研究通过运动员5周训练的粘膜免疫监控，探讨滑雪训练、粘膜免疫以及上呼吸道感染（URTI）的相关性。方法：以中国自由式滑雪空中技巧队10名队员作为研究对象。分别在训练课前和训练后采集唾液，检测指标包括sIgA和溶菌酶。在整个研究的过程中，每天询问运动员URTI症状，并由队医确诊。结果：一次训练课后sIgA、溶菌酶分泌率与训练课前相比显著降低（P<0.05）； URTI患病者患病期间sIgA分泌率显著低于患病者非患病期间的sIgA分泌率（P<0.05）；Logistic回归分析结果显示，唾液中sIgA分泌率低于5.0μg/min时，患URTI的危险度是高于5.0μg/min时的4.61倍（OR=4.61，95%可信区间：1.68-12.64，P<0.01）。结论：滑雪训练导致运动员粘膜免疫抑制；监测唾液sIgA可能预测URTI。
关键词：sIgA；溶菌酶；粘膜免疫；上呼吸道感染；优秀运动员
中图分类号：G80-05 文献标识码：A 文章编号：2095-2813（2017）08（c）-0000-00
运动作为一種应激，导致机体生理和免疫变化，据报道，中等强度、中等运动量的运动会导致机体免疫功能升高，而长期大强度运动训练后，机体免疫功能下降，出现免疫抑制，导致患上呼吸道感染（upper respiratory tract infections， URTI）的几率增加，影响运动员的竞技状态[1]。
唾液的免疫功能包括非特异免疫和特异免疫，具有非特异免疫作用的唾液成分包括乳铁蛋白、干扰素、唾液溶菌酶（lysozme， LZM）等蛋白酶抗菌物，其中唾液溶菌酶在唾液、鼻腔分泌物中浓度较高，有抗菌、抗病毒、消炎等作用。具有特异免疫作用的唾液成分主要包括sIgA、sIgG、sIgM等抗体，特异免疫物质中分泌型免疫球蛋白A（sIgA）具有抗菌、抗病毒的作用[2]，sIgA是粘膜局部抗感染的重要免疫物，在唾液中的含量最多，它在粘膜免疫中发挥着重要的作用，并且被称为抵御粘膜病原体和抗原的第一道防线。现有的研究结果显示，运动、运动员URTI与唾液sIgA、溶菌酶的关系尚存争议[3，4]。
本研究以中国自由式滑雪空中技巧队运动员为研究对象，通过5周训期间的粘膜免疫监控，探讨
运动、粘膜免疫与URTI的关系，为运动员预防URTI、保持最佳竞技状态提供依据。
1 研究对象与方法
1.1 研究对象
以中国自由式滑雪空中技巧国家队的10名冬季集训队员作为研究对象，实验地点在内蒙古阿尔山，时间为十一月份，平均气温零下20度左右，其中男队员5名（年龄：23.6±2.3 岁，身高：173.2±2.6 cm，体重：71.2±1.9 kg），女队员5名（年龄：24.2±2.2 岁，身高：161.8±1.8 cm，体重：52±2.8 kg）。在实验前，对全体研究对象说明研究目的及计划，并取得同意。
1.2 研究方法
1.2.1 唾液采集
唾液采集采取刺激法，运动员咀嚼salivette唾液采集管中的棉棒，咀嚼1分钟，咀嚼时按每秒一下的频率咀嚼。分别在运动员训练前及训练结束后采集唾液，全体运动员休息仅在8：20—8：45采集一次。
1.2.2 测试指标及方法
唾液sIgA的测定：采用酶联免疫法（ELISA）进行测定；唾液溶菌酶：采用比浊法进行测定。
1.2.3 健康调查
每天询问每位运动员是否有URTI症状，记录运动员的姓名及其症状（发热、头痛、咳嗽、咳痰、鼻塞、鼻涕、咽喉痛等），由队医结合症状诊断是否患有URTI。
1.3 统计分析
使用SPSS 16.0软件进行统计分析，采用配对t检验，分析一次运动对sIgA水平和溶菌酶水平的影响；采用独立样本t检验，分析URTI患病者sIgA水平和溶菌酶水平与非患病者sIgA水平和溶菌酶水平之间的关系及患病者在患病期间sIgA水平和溶菌酶水平与非患病期间sIgA水平和溶菌酶水平之间的关系；应用Logistic回归模型定量分析唾液中sIgA分泌率罹患URTI的危险度。
2 研究结果
2.1 一次训练课对唾液sIgA和溶菌酶的影响
一次训练课后，唾液sIgA浓度、分泌率显著降低（P<0.05），溶菌酶分泌率显著降低（P<0.05）（表1）。
2.2 唾液sIgA、溶菌酶与URTI的关系
2.2.1 URTI患病者与非患病者唾液免疫指标比较
患病者sIgA浓度与非患病者比较无统计学差异（P=0.570），患病者sIgA分泌率显著低于非患病者（P<0.05）；患病者溶菌酶浓度与非患病者比较无统计学差异（P=0.360），患病者溶菌酶分泌率显著低于非患病者（P<0.05）（表2）。
2.2.2 URTI患病者患病期间与非患病期间唾液免疫指标比较
患病期间sIgA浓度显著低于非患病期间的sIgA浓度（P<0.05），患病期间sIgA分泌率显著低于非患病期间的sIgA分泌率（P<0.05）；患病期间溶菌酶浓度与非患病期间比较无统计学差异（P=1），患病期间溶菌酶分泌率与非患病期间比较无统计学差异（P=0.298）（表3）。
Logistic回归分析结果显示，唾液中sIgA分泌率低于5.0μg/min时，患URTI的危险度是高于5.0μg/min时的4.61倍（OR=4.61，95%可信区间：1.68-12.64，P<0.01）（表4、表5）。
3 讨论
一次训练课对优秀运动员唾液sIgA分泌率的影响的研究结果显示，运动后皮艇运动员，游泳运动员的sIgA分泌率减少[5，6]，这与本研究结果一致。然而，在Mackinnon的研究中，运动员分别以50%，75%VO2max强度运动，运动后sIgA分泌率没有显著变化[7]，导致研究结果不同的原因可能是由于研究中的运动强度或运动的持续时间的不同造成的。 唾液α-淀粉酶是一种抗体蛋白，它的分泌因交感神经系统的活动增加而受刺激，这种蛋白大部分是由腮腺所产生的。有研究发现运动在一定程度上增加了唾液α-淀粉酶的活动，而这依赖于运动强度的大小[8]。本研究结果显示，运动员一次训练课或长期运动后，唾液溶菌酶水平均显著降低。有研究发现，20名健康男性以相当于VO2max的64%的运动强度运动2小时，运动后唾液溶菌酶的分泌率和浓度降低[9]。然而，部分研究结果显示，运动后唾液溶菌酶的水平升高。
一些研究者主张监测唾液sIgA水平对于确定优秀运动员感染的风险以及确认过度训练是有作用的[7，10]。1988年对俄罗斯奥林匹克优秀运动员的研究显示其分泌型sIgA水平的减少与URTI之间有直接关联，在最大强度训练期间URTI的增加与唾液免疫球蛋白的较低水平有关[11]。有研究报道优秀运动员和普通运动员，在经过7个月的训练之后，在两组研究对象间其唾液sIgA水平均与感染人数的数量呈负相关[6]。同样Fahlman研究显示足球运动员经过一季的训练之后，其唾液sIgA浓度和分泌率都有一个显著的降低，同时URTI的发生率增加[12]。针对优秀赛艇运动员进行的一项为期5个月的观察性研究显示，赛艇运动员乳铁蛋白的浓度较对照组低60%，溶菌酶的浓度在两组间也没有变化[13]。本研究对自由式滑雪空中技巧国家队进行为期5周的粘膜免疫监控，运动员长期训练后唾液sIgA分泌率显著降低，患URTI的风险增加，因此认为监测唾液sIgA分泌率可预测URTI的发生。通过Logistic分析结果显示，唾液sIgA分泌率低于5.0μg/min时，URTI的患病率显著上升，实际意义在于，当唾液检测指标接近或者低于这个数值时运动员患URTI的概率增加，从而为教练员调整运动员的训练提供参考依据。
4 结论
滑雪训练导致运动员粘膜免疫抑制；监测唾液sIgA可能预测URTI的发生。
参考文献
[1] Galazka-Franta A， Jura-Szoltys E， Smolka W， et al. Upper Respiratory tract diseases in athletes in different sports disciplines [J]. J Hum Kinet， 2016， 53（1）：99-106.
[2] Gleeson M. Immune function in sport and exercise [J]. Appl Physiol， 2007， 103（2）：693–699.
[3] Ihalainen JK， Schumann M， H?kkinen K， et al. Mucosal immunity and upper respiratory tract symptoms in recreational endurance runners[J]. Appl Physiol Nutr Metab， 2016， 41（1）：96-102.
[4] Gleeson M， Bishop NC， Oliveira M， et al. Respiratory infection risk in athletes： association with antigen-stimulated IL-10 production and salivary IgA secretion [J]. Scand J Med Sci Sports， 2012， 22（3）：410-417.
[5] Mackinnon L， Ginn E， Seymour GJ. Decreased salivary immunoglobulin A secretion rate after intense interval exercise in elite kayakers [J]. Eur J Appl Physiol Occup Physiol， 1993， 67（2）：180-184.
[6] Gleeson M， Mcdonald W， Cripps AW， et al. The effect on immunity of long-term intensive training in elite swimmers [J]. Clin Exp Immunol， 1995， 102（1）：210-216.
[7] Mackinnon LT， Hooper S. Mucosal （secretory） immune system responses to exercise of varying intensity and during overtraining [J]. Int J Sports Med， 1994， 15（S3）：S179–S183.
[8] Allgrove JE， Gomes E， Hough J， et al. Effects of exercise intensity on salivary antimicrobial proteins and markers of stress in active men [J]. J Sports Sci， 2008， 26（6）：653-661.
[9] Davison G， Diment BC. Bovine colostrum supplementation attenuates the decrease of salivary lysozyme and enhances the recovery of neutrophil fuction after prolonged exercise [J]. Br J Nutr， 2010， 103（10）：1425-1432.
[10] Gleeson M. Mucosal immune responses and risk of respiratory illness in elite athletes [J]. Exerc Immunol Rev， 2000， 6（6）：5-42.
[11] Levando VA， Suzdal’Nitskii RS， Pershin BB， et al. Study of secretory and antiviral immunity in sportsmen [J]. Sports Training Med Rehab， 1988， 1（1）：49–52.
[12] Fahlman MM， Engels HJ. Mucosal IgA and URTI in American college football players： A year longitudinal study [J]. Med Sci Sports Exerc， 2005， 37（3）：374-380.
[13] West NP， Pyne DB， Kyd JM， et al. The effect of exercise on innate mucosal immunity [J]. Br J Sports Med， 2010， 44（4）：227-231.
作者簡介：韩延柏（1968-），男，籍贯：河北省秦皇岛市，博士，教授，研究方向：运动免疫；
通讯作者：汪宏莉（1968-），女，籍贯：河北省昌黎县，博士，教授，研究方向：运动医学，邮箱：wanghl68@163.com
关键词：sIgA；溶菌酶；粘膜免疫；上呼吸道感染；优秀运动员
中图分类号：G80-05 文献标识码：A 文章编号：2095-2813（2017）08（c）-0000-00
运动作为一種应激，导致机体生理和免疫变化，据报道，中等强度、中等运动量的运动会导致机体免疫功能升高，而长期大强度运动训练后，机体免疫功能下降，出现免疫抑制，导致患上呼吸道感染（upper respiratory tract infections， URTI）的几率增加，影响运动员的竞技状态[1]。
唾液的免疫功能包括非特异免疫和特异免疫，具有非特异免疫作用的唾液成分包括乳铁蛋白、干扰素、唾液溶菌酶（lysozme， LZM）等蛋白酶抗菌物，其中唾液溶菌酶在唾液、鼻腔分泌物中浓度较高，有抗菌、抗病毒、消炎等作用。具有特异免疫作用的唾液成分主要包括sIgA、sIgG、sIgM等抗体，特异免疫物质中分泌型免疫球蛋白A（sIgA）具有抗菌、抗病毒的作用[2]，sIgA是粘膜局部抗感染的重要免疫物，在唾液中的含量最多，它在粘膜免疫中发挥着重要的作用，并且被称为抵御粘膜病原体和抗原的第一道防线。现有的研究结果显示，运动、运动员URTI与唾液sIgA、溶菌酶的关系尚存争议[3，4]。
本研究以中国自由式滑雪空中技巧队运动员为研究对象，通过5周训期间的粘膜免疫监控，探讨
运动、粘膜免疫与URTI的关系，为运动员预防URTI、保持最佳竞技状态提供依据。
1 研究对象与方法
1.1 研究对象
以中国自由式滑雪空中技巧国家队的10名冬季集训队员作为研究对象，实验地点在内蒙古阿尔山，时间为十一月份，平均气温零下20度左右，其中男队员5名（年龄：23.6±2.3 岁，身高：173.2±2.6 cm，体重：71.2±1.9 kg），女队员5名（年龄：24.2±2.2 岁，身高：161.8±1.8 cm，体重：52±2.8 kg）。在实验前，对全体研究对象说明研究目的及计划，并取得同意。
1.2 研究方法
1.2.1 唾液采集
唾液采集采取刺激法，运动员咀嚼salivette唾液采集管中的棉棒，咀嚼1分钟，咀嚼时按每秒一下的频率咀嚼。分别在运动员训练前及训练结束后采集唾液，全体运动员休息仅在8：20—8：45采集一次。
1.2.2 测试指标及方法
唾液sIgA的测定：采用酶联免疫法（ELISA）进行测定；唾液溶菌酶：采用比浊法进行测定。
1.2.3 健康调查
每天询问每位运动员是否有URTI症状，记录运动员的姓名及其症状（发热、头痛、咳嗽、咳痰、鼻塞、鼻涕、咽喉痛等），由队医结合症状诊断是否患有URTI。
1.3 统计分析
使用SPSS 16.0软件进行统计分析，采用配对t检验，分析一次运动对sIgA水平和溶菌酶水平的影响；采用独立样本t检验，分析URTI患病者sIgA水平和溶菌酶水平与非患病者sIgA水平和溶菌酶水平之间的关系及患病者在患病期间sIgA水平和溶菌酶水平与非患病期间sIgA水平和溶菌酶水平之间的关系；应用Logistic回归模型定量分析唾液中sIgA分泌率罹患URTI的危险度。
2 研究结果
2.1 一次训练课对唾液sIgA和溶菌酶的影响
一次训练课后，唾液sIgA浓度、分泌率显著降低（P<0.05），溶菌酶分泌率显著降低（P<0.05）（表1）。
2.2 唾液sIgA、溶菌酶与URTI的关系
2.2.1 URTI患病者与非患病者唾液免疫指标比较
患病者sIgA浓度与非患病者比较无统计学差异（P=0.570），患病者sIgA分泌率显著低于非患病者（P<0.05）；患病者溶菌酶浓度与非患病者比较无统计学差异（P=0.360），患病者溶菌酶分泌率显著低于非患病者（P<0.05）（表2）。
2.2.2 URTI患病者患病期间与非患病期间唾液免疫指标比较
患病期间sIgA浓度显著低于非患病期间的sIgA浓度（P<0.05），患病期间sIgA分泌率显著低于非患病期间的sIgA分泌率（P<0.05）；患病期间溶菌酶浓度与非患病期间比较无统计学差异（P=1），患病期间溶菌酶分泌率与非患病期间比较无统计学差异（P=0.298）（表3）。
Logistic回归分析结果显示，唾液中sIgA分泌率低于5.0μg/min时，患URTI的危险度是高于5.0μg/min时的4.61倍（OR=4.61，95%可信区间：1.68-12.64，P<0.01）（表4、表5）。
3 讨论
一次训练课对优秀运动员唾液sIgA分泌率的影响的研究结果显示，运动后皮艇运动员，游泳运动员的sIgA分泌率减少[5，6]，这与本研究结果一致。然而，在Mackinnon的研究中，运动员分别以50%，75%VO2max强度运动，运动后sIgA分泌率没有显著变化[7]，导致研究结果不同的原因可能是由于研究中的运动强度或运动的持续时间的不同造成的。 唾液α-淀粉酶是一种抗体蛋白，它的分泌因交感神经系统的活动增加而受刺激，这种蛋白大部分是由腮腺所产生的。有研究发现运动在一定程度上增加了唾液α-淀粉酶的活动，而这依赖于运动强度的大小[8]。本研究结果显示，运动员一次训练课或长期运动后，唾液溶菌酶水平均显著降低。有研究发现，20名健康男性以相当于VO2max的64%的运动强度运动2小时，运动后唾液溶菌酶的分泌率和浓度降低[9]。然而，部分研究结果显示，运动后唾液溶菌酶的水平升高。
一些研究者主张监测唾液sIgA水平对于确定优秀运动员感染的风险以及确认过度训练是有作用的[7，10]。1988年对俄罗斯奥林匹克优秀运动员的研究显示其分泌型sIgA水平的减少与URTI之间有直接关联，在最大强度训练期间URTI的增加与唾液免疫球蛋白的较低水平有关[11]。有研究报道优秀运动员和普通运动员，在经过7个月的训练之后，在两组研究对象间其唾液sIgA水平均与感染人数的数量呈负相关[6]。同样Fahlman研究显示足球运动员经过一季的训练之后，其唾液sIgA浓度和分泌率都有一个显著的降低，同时URTI的发生率增加[12]。针对优秀赛艇运动员进行的一项为期5个月的观察性研究显示，赛艇运动员乳铁蛋白的浓度较对照组低60%，溶菌酶的浓度在两组间也没有变化[13]。本研究对自由式滑雪空中技巧国家队进行为期5周的粘膜免疫监控，运动员长期训练后唾液sIgA分泌率显著降低，患URTI的风险增加，因此认为监测唾液sIgA分泌率可预测URTI的发生。通过Logistic分析结果显示，唾液sIgA分泌率低于5.0μg/min时，URTI的患病率显著上升，实际意义在于，当唾液检测指标接近或者低于这个数值时运动员患URTI的概率增加，从而为教练员调整运动员的训练提供参考依据。
4 结论
滑雪训练导致运动员粘膜免疫抑制；监测唾液sIgA可能预测URTI的发生。
参考文献
[1] Galazka-Franta A， Jura-Szoltys E， Smolka W， et al. Upper Respiratory tract diseases in athletes in different sports disciplines [J]. J Hum Kinet， 2016， 53（1）：99-106.
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[6] Gleeson M， Mcdonald W， Cripps AW， et al. The effect on immunity of long-term intensive training in elite swimmers [J]. Clin Exp Immunol， 1995， 102（1）：210-216.
[7] Mackinnon LT， Hooper S. Mucosal （secretory） immune system responses to exercise of varying intensity and during overtraining [J]. Int J Sports Med， 1994， 15（S3）：S179–S183.
[8] Allgrove JE， Gomes E， Hough J， et al. Effects of exercise intensity on salivary antimicrobial proteins and markers of stress in active men [J]. J Sports Sci， 2008， 26（6）：653-661.
[9] Davison G， Diment BC. Bovine colostrum supplementation attenuates the decrease of salivary lysozyme and enhances the recovery of neutrophil fuction after prolonged exercise [J]. Br J Nutr， 2010， 103（10）：1425-1432.
[10] Gleeson M. Mucosal immune responses and risk of respiratory illness in elite athletes [J]. Exerc Immunol Rev， 2000， 6（6）：5-42.
[11] Levando VA， Suzdal’Nitskii RS， Pershin BB， et al. Study of secretory and antiviral immunity in sportsmen [J]. Sports Training Med Rehab， 1988， 1（1）：49–52.
[12] Fahlman MM， Engels HJ. Mucosal IgA and URTI in American college football players： A year longitudinal study [J]. Med Sci Sports Exerc， 2005， 37（3）：374-380.
[13] West NP， Pyne DB， Kyd JM， et al. The effect of exercise on innate mucosal immunity [J]. Br J Sports Med， 2010， 44（4）：227-231.
作者簡介：韩延柏（1968-），男，籍贯：河北省秦皇岛市，博士，教授，研究方向：运动免疫；
通讯作者：汪宏莉（1968-），女，籍贯：河北省昌黎县，博士，教授，研究方向：运动医学，邮箱：wanghl68@163.com