【摘 要】
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采用PCR扩增和southern杂交筛选相结合的方法,从厦门水域的大型多管水母中分离到了新的绿色荧光蛋白基因gfpxm,并在大肠杆菌中进行了表达.gfpxmDNA序列编码区长为1 042 bp,包
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划);国家自然科学基金;福建省自然科学基金;国家重点实验室基金
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采用PCR扩增和southern杂交筛选相结合的方法,从厦门水域的大型多管水母中分离到了新的绿色荧光蛋白基因gfpxm,并在大肠杆菌中进行了表达.gfpxmDNA序列编码区长为1 042 bp,包含3个外显子和两个内含子,cDNA编码区全长为717 bp.gfpxm cDNA与已知野生型Aeqgfp 10 cDNA长度一致,核苷酸同源性为81.9%,推导的氨基酸序列全长为238个氨基酸,与AeqGFP10的氨基酸同源性为83.6%.将gfpxm克隆至pTO-T7表达载体,GFPxm在大肠杆菌BL21中的表达量达菌体总蛋白的50%左右.荧光性质和强度分析结果表明,GFPxm蛋白的激发峰为476 nm,发射峰为496 nm,荧光量子产率为1.GFPxm蛋白的荧光很稳定,对热、碱性、变性剂和盐等有较强抗性.
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