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摘要 [目的]应用超高效液相色谱-质谱（UPLC/MS/MS）串联技术，建立检测水体中灭多威农药残留的方法。[方法]水样经HLB固相萃取柱萃取，甲醇洗脱，洗脱液经旋转蒸发、氮吹至干，乙腈∶水（V/V，19∶1）溶解。[结果]该方法灭多威农药检出限为0.063 μg/L，加标回收率为87.90%～109.00%，相对标准偏差为3.6%～8.5%。[结论] 该方法能够满足常规检测地下水和生活饮用水中灭多威农药残留。
关鍵词 超高效液相色谱质谱串联法；固相萃取；灭多威
中图分类号 X832 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2018）23-0166-02
Abstract [Objective]To establish a method for determination of methomyl in water by ultra perfomance liquid chromatographytandem mass spectrometry.[Method] The water sample was filtered through HLB column. Methomyl on the HLB column were eluted using methanol and the eluted solution was concentrated to 1mL under rotary evaporation and was blown to dryness under nitrogen gas.The residue was dissolved with acetonitrile and water（V/V， 19∶1）.[Result]The detection limits，standard addition recoveries and RSD of methomyl was 0.063μg/L ， 87.90%-109.00% and 3.6%-8.5% ， respectively.[Conclusion]The method could meet a demand for detecting methomyl residue in groundwater and drinking water.
Key words UPLC/MS/MS；Solidphase extraction；Methomyl
灭多威（Methomyl）是一种内吸性高效杀虫剂，毒性强，属氨基甲酸酯类，呈白色晶状体，有轻微的硫磺气味。由于灭多威的化学结构特性使其具有雌激素样作用，1997 年世界野生动物基金会将灭多威列为可疑内分泌干扰物[1]。由于灭多威在农业方面的使用量较大，同时灭多威溶解性较强、在水中半衰期时间较长，导致在食品、土壤、地下水以及地表水均监测到灭多威残留[2]，对水生生物和人类的健康具有严重威胁。因此，测定水中灭多威残留含量具有重要的意义。
灭多威的检测方法主要有液相色谱法[3-4]，前处理方法主要有固相萃取[5-7]和液液萃取[8-10]。选用固相萃取-超高液相色谱/质谱检测方法测定水中灭多威残留的含量，此方法具有稳定性好、灵敏度高和检测时间短的优点。
1 材料与方法
1.1 试剂与材料
试剂：甲醇、 乙腈均为色谱纯，Merck KGaA（默克，德国塔姆施塔特市）；乙酸铵（优级纯）；灭多威（农业部环境保护科研监测所）；试验所用水均为超纯水；CNW Poly-Sery HLB固相萃取柱（60 mg，3 mL）。
1.2 仪器
超高液相色谱串联质谱（UPLC/MS/MS，waters）；固相萃取仪（CNW Technologies）；旋转蒸发器（上海申顺生物科技有限公司）；多功能氮吹仪（济南海能仪器有限公司）；超高液相色谱柱ACQUITY UPLC BEH（C18 1.7 μm，2.1×50 column）。
1.3 方法
1.3.1 仪器条件。
流动相：梯度洗脱，流动相参数见表1；柱温：40 ℃；进样量：10 μL；离子源：电喷雾离子源（ESI.+）；毛细管电压3.2 kV；脱溶剂气温度400 ℃；脱溶剂气流速800 L/Hr；锥孔气流速50 L/Hr；碰撞能量8V。定量离子对及对应的锥孔电压、碰撞能量、保留时间等见表2。图1为在该试验条件下50 μg/L灭多威标准溶液的总离子流图。
1.3.2 样品处理。
用10 mL甲醇使HLB固相萃取小柱在低真空状态下活化，再用10 mL超纯水平衡固相萃取柱，取水样50 mL并连续通过萃取柱，调节真空度控制流速在0.8 mL/min左右，水样全部抽完后，用10 mL超纯水洗涤，然后继续真空下抽干5 min，最后用15 mL甲醇洗脱，收集洗脱液至梨形瓶，在40 ℃水浴中旋转蒸发至0.5～1.0 mL，于氮吹仪下氮气吹干，加入乙腈∶水（V/V，19∶1）1 mL于梨形瓶中反复振荡溶解，0.22 μm微孔滤膜过滤。按照1.3.1仪器条件检测。
2 结果与分析
2.1 标准曲线、线性范围、检出限和保留时间
配制标准工作液5、10、50、100 μg/L浓度系列，按照1.3.1仪器条件进行检测，以所得的峰面积（y）与浓度（x）进行回归分析，得出灭多威农药的标准曲线为y=8 613.1x-6 815.8（r=0.999 66），灭多威保留时间为1.38 min。
2.2 方法的回收率和精密度
根据标准曲线范围，于50 mL水样中加入标准工作液10、50 μg /L各1 mL，测定方法精密度，结果见表3。灭多威农药回收率为87.90%～109.00%，灭多威检出限为0.063 μg/L，相对标准偏差为3.6%～8.5%。 2.3 实际样品加标试验
选取某处的自来水进行测定。在该自来水试样中加入灭多威标准溶液使其浓度为 1 μg/L，充分混匀，按试验条件和方法进行检测。计算实际样品和加标回收率，灭多威的加标回收率为91.08%～107.60%。
3 结论
应用超高效液相色谱质谱串联法检测水中灭多威农药残留含量，其回收率为87.90%～109.00%，检出限为0.063 μg/L，相对标准偏差为3.6%～8.5%。
该方法能够满足常规检测地下水和生活饮用水中灭多威农药残留，并具有较好的实用性。
参考文献
[1] YI M Q，LIU H X，SHI X Y，et al.Inhibitory effects of four carbamate insecticides on acetylcholinesterase of male and female Carassius auratus in vitro[J].Comparative biochemistry and physiology， part C，2006，143（1）：113-116.
[2] 孟顺龙，徐跑，瞿建宏，等.灭多威在环境中的残留与毒理效應研究进展[J].生态学杂志，2013，32（9）：2485-2493.
[3] 徐广通，郑树学，许崇娟.灭多威及其合成中间体的高效液相色谱分析测试研究[J].山东化工，1995（4）：38-40.
[4] 丁晨红，骆冲，邓义才，等.分散固相萃取-反相高效液相色谱法测定蔬菜、水果中 10 种氨基甲酸酯类农药残留[J].热带农业科学，2014，34（4）：77-82.
[5] 张学健，程永红，李世荣.固相萃取 /高效液相色谱法测定生活饮用水中氨基甲酸酯类农药[J].中国卫生检验杂志，2014，24（9）：1243-1245.
[6] 任飞，张跃文，董金龙.高效液相色谱串联质谱法测定饮用水中辛硫磷和灭多威的农药残留[J].光谱实验室，2011，28（3）：1435-1437.
[7] 杨晓松，余辉菊，马子元.固相膜萃取-高效液相色谱法测定饮用水中 12 种氨基甲酸酯类农药残留[J].中国卫生检验杂志，2012，22（7）：1539-1541.
[8] 代雪芳，张雪燕，杨韶松.气相色谱法测定烟草中灭多威残留量[J].云南农业大学学报，2007，22（4）：507-509.
[9] 贺兰，龚道新，何宗桃，等.灭多威在棉田中的残留分析与检测方法[J].湖南农业科学，2009（9）：94-96.
[10] 宋志法，刘丽丽，徐少才，等.液液萃取高效液相色谱法测定水中灭多威肟和灭多威[J].分析试验室，2015，34（9）：1042-1044.
关鍵词 超高效液相色谱质谱串联法；固相萃取；灭多威
中图分类号 X832 文献标识码 A 文章编号 0517-6611（2018）23-0166-02
Abstract [Objective]To establish a method for determination of methomyl in water by ultra perfomance liquid chromatographytandem mass spectrometry.[Method] The water sample was filtered through HLB column. Methomyl on the HLB column were eluted using methanol and the eluted solution was concentrated to 1mL under rotary evaporation and was blown to dryness under nitrogen gas.The residue was dissolved with acetonitrile and water（V/V， 19∶1）.[Result]The detection limits，standard addition recoveries and RSD of methomyl was 0.063μg/L ， 87.90%-109.00% and 3.6%-8.5% ， respectively.[Conclusion]The method could meet a demand for detecting methomyl residue in groundwater and drinking water.
Key words UPLC/MS/MS；Solidphase extraction；Methomyl
灭多威（Methomyl）是一种内吸性高效杀虫剂，毒性强，属氨基甲酸酯类，呈白色晶状体，有轻微的硫磺气味。由于灭多威的化学结构特性使其具有雌激素样作用，1997 年世界野生动物基金会将灭多威列为可疑内分泌干扰物[1]。由于灭多威在农业方面的使用量较大，同时灭多威溶解性较强、在水中半衰期时间较长，导致在食品、土壤、地下水以及地表水均监测到灭多威残留[2]，对水生生物和人类的健康具有严重威胁。因此，测定水中灭多威残留含量具有重要的意义。
灭多威的检测方法主要有液相色谱法[3-4]，前处理方法主要有固相萃取[5-7]和液液萃取[8-10]。选用固相萃取-超高液相色谱/质谱检测方法测定水中灭多威残留的含量，此方法具有稳定性好、灵敏度高和检测时间短的优点。
1 材料与方法
1.1 试剂与材料
试剂：甲醇、 乙腈均为色谱纯，Merck KGaA（默克，德国塔姆施塔特市）；乙酸铵（优级纯）；灭多威（农业部环境保护科研监测所）；试验所用水均为超纯水；CNW Poly-Sery HLB固相萃取柱（60 mg，3 mL）。
1.2 仪器
超高液相色谱串联质谱（UPLC/MS/MS，waters）；固相萃取仪（CNW Technologies）；旋转蒸发器（上海申顺生物科技有限公司）；多功能氮吹仪（济南海能仪器有限公司）；超高液相色谱柱ACQUITY UPLC BEH（C18 1.7 μm，2.1×50 column）。
1.3 方法
1.3.1 仪器条件。
流动相：梯度洗脱，流动相参数见表1；柱温：40 ℃；进样量：10 μL；离子源：电喷雾离子源（ESI.+）；毛细管电压3.2 kV；脱溶剂气温度400 ℃；脱溶剂气流速800 L/Hr；锥孔气流速50 L/Hr；碰撞能量8V。定量离子对及对应的锥孔电压、碰撞能量、保留时间等见表2。图1为在该试验条件下50 μg/L灭多威标准溶液的总离子流图。
1.3.2 样品处理。
用10 mL甲醇使HLB固相萃取小柱在低真空状态下活化，再用10 mL超纯水平衡固相萃取柱，取水样50 mL并连续通过萃取柱，调节真空度控制流速在0.8 mL/min左右，水样全部抽完后，用10 mL超纯水洗涤，然后继续真空下抽干5 min，最后用15 mL甲醇洗脱，收集洗脱液至梨形瓶，在40 ℃水浴中旋转蒸发至0.5～1.0 mL，于氮吹仪下氮气吹干，加入乙腈∶水（V/V，19∶1）1 mL于梨形瓶中反复振荡溶解，0.22 μm微孔滤膜过滤。按照1.3.1仪器条件检测。
2 结果与分析
2.1 标准曲线、线性范围、检出限和保留时间
配制标准工作液5、10、50、100 μg/L浓度系列，按照1.3.1仪器条件进行检测，以所得的峰面积（y）与浓度（x）进行回归分析，得出灭多威农药的标准曲线为y=8 613.1x-6 815.8（r=0.999 66），灭多威保留时间为1.38 min。
2.2 方法的回收率和精密度
根据标准曲线范围，于50 mL水样中加入标准工作液10、50 μg /L各1 mL，测定方法精密度，结果见表3。灭多威农药回收率为87.90%～109.00%，灭多威检出限为0.063 μg/L，相对标准偏差为3.6%～8.5%。 2.3 实际样品加标试验
选取某处的自来水进行测定。在该自来水试样中加入灭多威标准溶液使其浓度为 1 μg/L，充分混匀，按试验条件和方法进行检测。计算实际样品和加标回收率，灭多威的加标回收率为91.08%～107.60%。
3 结论
应用超高效液相色谱质谱串联法检测水中灭多威农药残留含量，其回收率为87.90%～109.00%，检出限为0.063 μg/L，相对标准偏差为3.6%～8.5%。
该方法能够满足常规检测地下水和生活饮用水中灭多威农药残留，并具有较好的实用性。
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[7] 杨晓松，余辉菊，马子元.固相膜萃取-高效液相色谱法测定饮用水中 12 种氨基甲酸酯类农药残留[J].中国卫生检验杂志，2012，22（7）：1539-1541.
[8] 代雪芳，张雪燕，杨韶松.气相色谱法测定烟草中灭多威残留量[J].云南农业大学学报，2007，22（4）：507-509.
[9] 贺兰，龚道新，何宗桃，等.灭多威在棉田中的残留分析与检测方法[J].湖南农业科学，2009（9）：94-96.
[10] 宋志法，刘丽丽，徐少才，等.液液萃取高效液相色谱法测定水中灭多威肟和灭多威[J].分析试验室，2015，34（9）：1042-1044.