小鼠软骨前体细胞ATDC5中沉默骨膜蛋白基因能延缓软骨退变

• 作 者: 欧阳家耀 张海严 方航 曾春 赵畅 邵焱 宋家凛 蔡道章
• 机 构: 510630 广州，南方医科大学第三附属医院关节外科 广东省骨科研究院,510630 广州，南方医科大学第三附属医院关节外科 广东省骨科研究院,510630 广州，南方医科大学第三附属医院关节外科 广
• 出 处: 中华实验外科杂志
• 发表日期: 2018年35期
• 关键词: 骨关节炎 骨膜蛋白 小干扰RNA 关节软骨

目的

观察骨膜蛋白(Postn)在骨关节炎软骨面的表达，探讨其对软骨退变的作用及作用机制。

方法

把C57/BL6小鼠随机分为实验组和对照组，实验组小鼠右膝关节采用内侧半月板不稳定(DMM)法建立骨关节炎模型，对照组则只切开皮肤和关节囊，采用番红O-固绿及甲苯胺蓝染色观察关节软骨面的变化及用免疫组织化学检测关节软骨面Postn的表达水平。然后通过体外实验用白细胞介素(IL)-1β诱导ATDC5软骨前体细胞株发生骨关节炎，再采取siRNA oligo干扰Postn基因的表达，继而通过实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测OA相关因子的表达水平。

结果

动物实验中，相对于Sham组，DMM组关节软骨厚度明显变薄(DMM 4周比Sham 4周，P＝0.000；DMM 8周比Sham 8周，P＝0.001)；国际骨关节炎研究学会(OARSI)评分明显升高(DMM 4周比Sham 4周，P＝0.005；DMM 8周比Sham 8周，P＝0.002)；Postn的阳性细胞率明显增多(DMM 4周比Sham 4周，P＝0.000；DMM 8周比Sham 8周，P＝0.004)。体外实验中，相对于NC组，IL-1β＋siScramble组中Postn (1.65±0.23，P＝0.008)、基质金属蛋白酶-13(MMP-13)，1.75±0.24，P＝0.005)、含Ⅰ型血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶5(ADAMTS-5，4.63±1.58，P＝0.017)、血管内皮生长因子(VEGF，6.24±0.90，P＝0.001)、Runt相关转录因子2(Runx2，1.54±0.14，P＝0.003)表达升高，但10型胶原A1(COL10a1，1.12±0.12，P＝0.161)差异无统计学意义。而相对于IL-1β＋siScramble组，IL-1β＋siPostn组Postn (0.51±0.17，P＝0.002)、MMP-13 (0.79±0.09，P＝0.003)、ADAMTS-5 (0.90±0.11，P＝0.015)、VEGF (1.04±0.62，P＝0.001)、Runx2(0.82±0.14，P＝0.003)、COL10a1 (0.77±0.11，P＝0.020)的表达均不同程度的下降。

结论

Postn在DMM骨关节炎软骨面表达升高。ATDC5软骨前体细胞中沉默Postn基因能延缓软骨退变。