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【摘要】 目的 优选白芍的最佳水提工艺。方法 以出膏率、芍药苷提取率和芍药苷含量为指标，采用加水量、煎煮时间、煎煮次数和煎煮温度四因素、三水平L9（34）正交试验法，优选白芍的最佳水提工艺。结果 白芍的最佳水提工艺为：50℃浸泡30分钟，煎煮两次，每次6倍量水，每次1.5小时。结论 确定的白芍水提工艺使芍药苷和芍药苷的转移率分别达到6.98mg/g和87.57%以上，说明确定的白芍的水提工艺稳定可行。
【关键词】 白芍；水提工艺；正交试验
白芍为毛莨科植物芍药Paeonia lactiflora pall.的干燥根。性微寒，味苦、酸，归肝脾二经。白芍具有养血调经、柔肝止痛、平肝抑阳之功效[1-2]。对白芍采用水提法，选用加水量、煎煮时间、煎煮次数作考察因素，以出膏率、芍药苷提取率和芍药苷含量为指标，确定白芍水提最佳工艺。
1 资料与方法
1.1 一般资料 白芍，市售；HH数显恒温水浴锅（江苏省金坛市金城国际实验仪器厂）；电热套（北京中兴伟业有限公司）；JJ200B型电子天平（美国双杰兄弟江苏常熟有限公司）；HU10260B型超声波清洗器（天津恒奥科技发展有限公司）；安捷伦1200高效液相色谱仪（美国安捷伦科技有限公司）；纯化水（自制）；纯净水（杭州哇哈哈集团）；甲醇、乙腈（色谱纯）；磷酸；其余试剂均为分析纯。
1.2 试验方法
1.2.1 正交试验因素水平表 对白芍采用水提法，选用加水量、煎煮时间、煎煮次数作考察因素，每个因素选择3个水平，用L9（34）正交表进行实验设计，因素水平，见表1。
1.2.2 正交试验实验方法
1.2.2.1 正交实验方法 取白芍饮片9份，每份30.00g，置500ml圆底烧瓶中，按表2加入一定量水，置50℃水浴锅浸泡30分钟，按表2进行试验；药液过300目筛，合并至500ml容量瓶中，定容。精密吸取药液50ml置恒重的蒸发皿中，置水浴锅上蒸干、105℃烘箱烘3h，测出膏率。芍药苷测定方法见下。
1.2.2.2 芍药苷测定方法[4] 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%磷酸溶液（14：86）为流动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含60μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备吸取定容到500ml的上述溶液2.0ml置50ml量瓶中，加乙醇18.5ml，加水14.5ml，超声处理（功率240W，频率40kHz）30分钟，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
2 试验结果及分析
2.1 L9（34）正交试验结果 见表2。
2.2 方差分析 见表3。
2.3 结果分析 从表3出膏率的数据来看，煎煮次数对出膏率的影响最大，其次为煎煮时间，影响最小为加水量，即C﹥B﹥A；由K值可得出最佳的提取工艺为A1B3C3，但从经济效益考虑，可选择A1B2C2，即加6倍水，煎煮1.5小时，煎煮2次。
从表3出膏率数据看，煎煮时间具有显著差异，煎煮次数具有极显著差异。但从表3出膏率K值看，煎煮时间、煎煮次数的差异不明显（即与表4结论相矛盾）；这可能与采用50℃浸泡之后，致使提取过程中加水量、煎煮时间、煎煮次数对出膏率的影响较小或因为白芍煎煮后很难过滤所致。同时，导致表4出膏率的加水量的S很小，煎煮时间、煎煮次数的临界值较大。
从表3芍药苷含量的数据来看，加水量、煎煮时间与煎煮次数均无显著性差异，总的趋势为煎煮次数影响稍大，煎煮时间次之，加水量影响最小，即C﹥B﹥A。
3 结论
综合分析，白芍的最佳提取工艺是：以饮片投料，50℃浸泡30分钟，煎煮两次，每次6倍量水，每次1.5小时。按最佳工艺提取，芍药苷的转移率可达87.57%。
参考文献
[1] 夏颖，殷志爽，石晨，等.白芍提取物及其有效成分抗氧化活性的研究[J].首都医科大学学报，2013，（1）：120-125.
[2] 谢仲德，李文烈，方应权，等.白芍中芍药苷的闪式提取工艺研究[J].中成药，2013，35（9）：2037-2039.
[3] 于定荣，顾雪竹，张村，等.白芍中芍药苷提取工艺的对比研究[J].中国实验方剂学杂志，2013，19（15）：49-51.
[4] 张瑜，唐志书，张岗，等.白芍中芍药苷提取方法的比较研究[J].现代中医药，2013，（1）：84-86.
[5] 中华人民共和国药典.一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：96.
【关键词】 白芍；水提工艺；正交试验
白芍为毛莨科植物芍药Paeonia lactiflora pall.的干燥根。性微寒，味苦、酸，归肝脾二经。白芍具有养血调经、柔肝止痛、平肝抑阳之功效[1-2]。对白芍采用水提法，选用加水量、煎煮时间、煎煮次数作考察因素，以出膏率、芍药苷提取率和芍药苷含量为指标，确定白芍水提最佳工艺。
1 资料与方法
1.1 一般资料 白芍，市售；HH数显恒温水浴锅（江苏省金坛市金城国际实验仪器厂）；电热套（北京中兴伟业有限公司）；JJ200B型电子天平（美国双杰兄弟江苏常熟有限公司）；HU10260B型超声波清洗器（天津恒奥科技发展有限公司）；安捷伦1200高效液相色谱仪（美国安捷伦科技有限公司）；纯化水（自制）；纯净水（杭州哇哈哈集团）；甲醇、乙腈（色谱纯）；磷酸；其余试剂均为分析纯。
1.2 试验方法
1.2.1 正交试验因素水平表 对白芍采用水提法，选用加水量、煎煮时间、煎煮次数作考察因素，每个因素选择3个水平，用L9（34）正交表进行实验设计，因素水平，见表1。
1.2.2 正交试验实验方法
1.2.2.1 正交实验方法 取白芍饮片9份，每份30.00g，置500ml圆底烧瓶中，按表2加入一定量水，置50℃水浴锅浸泡30分钟，按表2进行试验；药液过300目筛，合并至500ml容量瓶中，定容。精密吸取药液50ml置恒重的蒸发皿中，置水浴锅上蒸干、105℃烘箱烘3h，测出膏率。芍药苷测定方法见下。
1.2.2.2 芍药苷测定方法[4] 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.1%磷酸溶液（14：86）为流动相；检测波长为230nm。理论板数按芍药苷峰计算应不低于2000。
对照品溶液的制备精密称取芍药苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含60μg的溶液，即得。
供试品溶液的制备吸取定容到500ml的上述溶液2.0ml置50ml量瓶中，加乙醇18.5ml，加水14.5ml，超声处理（功率240W，频率40kHz）30分钟，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。
2 试验结果及分析
2.1 L9（34）正交试验结果 见表2。
2.2 方差分析 见表3。
2.3 结果分析 从表3出膏率的数据来看，煎煮次数对出膏率的影响最大，其次为煎煮时间，影响最小为加水量，即C﹥B﹥A；由K值可得出最佳的提取工艺为A1B3C3，但从经济效益考虑，可选择A1B2C2，即加6倍水，煎煮1.5小时，煎煮2次。
从表3出膏率数据看，煎煮时间具有显著差异，煎煮次数具有极显著差异。但从表3出膏率K值看，煎煮时间、煎煮次数的差异不明显（即与表4结论相矛盾）；这可能与采用50℃浸泡之后，致使提取过程中加水量、煎煮时间、煎煮次数对出膏率的影响较小或因为白芍煎煮后很难过滤所致。同时，导致表4出膏率的加水量的S很小，煎煮时间、煎煮次数的临界值较大。
从表3芍药苷含量的数据来看，加水量、煎煮时间与煎煮次数均无显著性差异，总的趋势为煎煮次数影响稍大，煎煮时间次之，加水量影响最小，即C﹥B﹥A。
3 结论
综合分析，白芍的最佳提取工艺是：以饮片投料，50℃浸泡30分钟，煎煮两次，每次6倍量水，每次1.5小时。按最佳工艺提取，芍药苷的转移率可达87.57%。
参考文献
[1] 夏颖，殷志爽，石晨，等.白芍提取物及其有效成分抗氧化活性的研究[J].首都医科大学学报，2013，（1）：120-125.
[2] 谢仲德，李文烈，方应权，等.白芍中芍药苷的闪式提取工艺研究[J].中成药，2013，35（9）：2037-2039.
[3] 于定荣，顾雪竹，张村，等.白芍中芍药苷提取工艺的对比研究[J].中国实验方剂学杂志，2013，19（15）：49-51.
[4] 张瑜，唐志书，张岗，等.白芍中芍药苷提取方法的比较研究[J].现代中医药，2013，（1）：84-86.
[5] 中华人民共和国药典.一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：96.