探讨胰腺癌细胞来源的微囊泡及其包裹的miRNA在胰腺癌诱导糖尿病发生中的作用。
方法收集3种胰腺癌细胞株SW1990、BxPC3及PANC1的培养上清液，使用梯度离心法分离微囊泡，通过蛋白质印迹试验及荧光标记的方法证实胰腺癌来源的微囊泡可进入胰岛细胞株MIN6中。分别测定3种胰腺癌细胞分泌的微囊泡及去除微囊泡的上清液中miRNA-19a的含量。以经3种胰腺癌细胞来源的微囊泡分别处理后的MIN6细胞为3个实验组，未处理的MIN6细胞为对照组，测定miRNA-19a水平及胰岛素分泌功能变化。通过脂质体转染的方式将miRNA-19a前体及其抑制物分别转入胰岛细胞MIN6中，观察其对胰岛素分泌的影响。
结果经蛋白质印迹试验检测微囊泡的标志蛋白CD63及AGO2，证实胰腺癌细胞来源的微囊泡可以进入胰岛细胞MIN6中。SW1990、BxPC3、PANC1细胞微囊泡和去除微囊泡的培养上清液中miRNA-19a的含量分别为(132.7±16.0)和(32.8±4.3)，(78.4±8.9)和(22.6±3.3)，(63.3±12.0)和(23.3±3.3) pmol/L，差异均有统计学意义(t＝10.44、10.12、5.56，P 均<0.01)。与对照组MIN6细胞相比，经SW1990、BxPC3和PANC1来源的微囊泡处理后MIN6细胞的miRNA-19a表达量均明显升高，其2－△△Ct值分别为2.02±0.50、1.80±0.41和2.11±0.59，差异均有统计学意义(t＝2.97、2.77、2.84，P均<0.05)。在高糖刺激下，经SW1990、BxPC-3、PANC1来源微囊泡处理的3组胰岛细胞均出现了胰岛素分泌量下降，分别为(103.73±16.49)、(141.17±11.26)、(138.24±13.97) ng·mg蛋白－1·h－1，对照组胰岛素分泌量为(256.24±33.05) ng·mg蛋白－1·h－1，差异均有统计学意义(t＝4.13、3.30、3.29，P均<0.05)；转染miRNA-19a前体的MIN6细胞的胰岛素分泌量较对照组明显下降，分别为(126.17±62.87)和(316.72±91.87) ng·mg蛋白－1·h－1，差异有统计学意义(t＝2.97，P<0.05)；转染miRNA-19a抑制物的MIN6细胞的胰岛素分泌量较对照组明显增高，分别为(697.47±77.62)和(355.33±84.77) ng·mg蛋白－1·h－1，差异有统计学意义(t＝－2.97，P<0.05)。
结论胰腺癌细胞分泌的微囊泡进入胰岛细胞MIN6后，可引起胰岛素分泌功能的障碍，其miRNA-19a可能是重要的信号分子。