【摘 要】
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目的:应用L-02 细胞建立长期低剂量镉转化细胞模型.观察转化细胞形态学变化,检测转化细胞增殖、凋亡和甲基化的改变,探讨长期低剂量镉导致细胞转化的机制.方法:采用MTT 法、形态学分析、Western blot、细胞克隆形成、流式细胞术、限制性内切酶酶切电泳和MSP.分组:对照组、CDT-L-02 组、5-aza 组和CDT-L-02+5-Aza 组.结果:(1)1 μmol/L 氯化镉培养L-0
【机 构】
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吉林大学基础医学院病理生理学系,吉林长春130021
【出 处】
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中国病理生理学会第十届全国代表大会
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目的:应用L-02 细胞建立长期低剂量镉转化细胞模型.观察转化细胞形态学变化,检测转化细胞增殖、凋亡和甲基化的改变,探讨长期低剂量镉导致细胞转化的机制.方法:采用MTT 法、形态学分析、Western blot、细胞克隆形成、流式细胞术、限制性内切酶酶切电泳和MSP.分组:对照组、CDT-L-02 组、5-aza 组和CDT-L-02+5-Aza 组.结果:(1)1 μmol/L 氯化镉培养L-02 细胞第2 周时,细胞长轴逐渐变长;10 周时,细胞从方形变成长梭形;与对照组相比,转化细胞DNMT1 表达稳定升高,caspase-8 表达稳定下降.与对照组L-02 细胞相比,转化细胞的增殖率,克隆形成率明显升高.(2)转化细胞在甲基化抑制剂5-Aza 的作用下,与对照组相比,增殖率明显下降,凋亡率明显增加;DNMTs、caspase-8 与凋亡和周期相关蛋白的表达在5-Aza的作用下恢复到对照组的水平;基因组和caspase-8 基因启动子甲基化的水平也有所恢复.结论:长期低剂量镉能促进正常肝细胞L-02 增殖增加,凋亡减少,导致正常细胞发生转化,其机制是提高了基因组DNA 和caspase-8 基因启动子甲基化的水平.
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