【摘 要】
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目的利用荧光定量PCR技术，建立快速敏感特异的产气荚膜梭菌检测方法。方法以产气荚膜梭菌基因作为靶序列，设计一对引物和探针，以产气荚膜梭菌菌株提取核酸DNA作为模板，优化引物和
【基金项目】
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基金项目：全军医学科学技术研究“十一五”专项（082009）
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目的利用荧光定量PCR技术，建立快速敏感特异的产气荚膜梭菌检测方法。方法以产气荚膜梭菌基因作为靶序列，设计一对引物和探针，以产气荚膜梭菌菌株提取核酸DNA作为模板，优化引物和探针的浓度比，同时验证方法的灵敏度、特异性、重复性。结果反应体系在上、下游引物浓度均为1μmol／L，探针浓度为0．1μmol／L时，具有良好的特异性和灵敏度，与创伤弧菌等24种相关细菌均无交叉反应，对纯菌检测的灵敏度为9×10^2CFU／ml，重复性试验证实该体系重复性好，稳定性高；3例临床样本检测结果与细菌培养结果相符。
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