【摘 要】
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目的:载脂蛋白M（apoM）是高密度脂蛋白（HDL）的组成部分之一,且前期研究表明apoM可能通过24-脱氢胆固醇还原酶（DHCR24）途径抑制TNF-α诱导的白细胞介素-1β（IL-1β）、单核细胞趋化蛋白-
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目的:载脂蛋白M（apoM）是高密度脂蛋白（HDL）的组成部分之一,且前期研究表明apoM可能通过24-脱氢胆固醇还原酶（DHCR24）途径抑制TNF-α诱导的白细胞介素-1β（IL-1β）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的表达。本研究旨在探究apoM是否通过DHCR24途径发挥抗炎作用。方法:（1）应用阴性对照慢病毒和携带apoM基因的慢病毒分别转染EA.hy926细胞。获得稳定表达apoM的细胞株后提取总RNA和蛋白,检测携带apoM基因的慢病毒感染的EA.hy926细胞(apoMTg细胞)和阴性对照慢病毒感染的EA.hy926细胞(apoMTgN细胞)中apoM mRNA与蛋白表达水平。（2）将病毒转染后的apoMTgN细胞和apoMTg细胞传代培养,并各以6×106个/ml的密度均匀铺入两块六孔板中（即对照组与实验组）,待细胞完全贴壁后,对照组与实验组中分别加入PBS与10ng/ml的TNF-α处理3h、6h,均提取总RNA检测B类Ⅰ型清道夫受体（SR-B1）、DHCR24以及IL-1β、MCP-1的mRNA表达水平。（3）将病毒转染后的apoMTgN细胞和apoMTg细胞传代培养,并各以6×106个/ml的密度均匀铺入四块六孔板中（即对照组A、B与实验组C、D）,待细胞完全贴壁后,对照组A、实验组C与对照组B、实验组D中分别加入无水乙醇与10 uM的BLT-1（SR-B1抑制剂）处理12h,然后在所有的对照组与实验组中均加入10 ng/ml的TNF-α处理6h,均提取总RNA检测DHCR24、IL-1β、MCP-1的mRNA表达水平。结果:（1）apoMTg细胞中apoM mRNA和蛋白表达水平显著高于apoMTgN细胞。（2）生理情况下或炎症刺激作用下,apoMTg细胞中SR-B1、DHCR24 mRNA表达水平显著高于apoMTgN细胞;生理情况下,apoMTg细胞与apoMTgN细胞的IL-1β、MCP-1的mRNA表达水平无统计学意义;炎症刺激作用下,apoMTg细胞中IL-1β、MCP-1的mRNA表达水平显著低于apoMTgN细胞。（3）apoMTg细胞中DHCR24 mRNA表达水平显著高于apoMTgN细胞;apoMTg细胞经BLT-1处理12后,DHCR24 mRNA表达水平显著下降,而IL-1β、MCP-1的mRNA表达水平并无统计学意义。结论:apoM能显著增加SR-B1和DHCR24的表达,并且通过SR-B1受体上调DHCR24的表达,然而并非通过该途径抑制TNF-α诱导的IL-1β、MCP-1的表达,即apoM可能通过其他途径发挥其抗炎作用。apoM可通过SR-B1上调DHCR24发挥抗氧化应激作用。
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