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【研究背景】
代谢重编程是肿瘤新的“十大特征”之一，肿瘤代谢重编程主要体现在糖、脂及氨基酸代谢的异常，其中，与葡萄糖或氨基酸代谢相比，肿瘤脂代谢重编程的研究相对较少。乙酰辅酶A羧化酶ACC1(Acetyl-CoA carboxylase)是调控脂肪酸从头合成第一步的限速酶，其主要通过催化乙酰辅酶A生成丙二酰辅酶A而调控脂肪酸合成。课题组前期研究发现，位于ACC1基因rs11871275的SNP位点与肺癌患者术后总生存率显著相关，然而ACC1在HCC中的表达情况及生物学作用尚不十分清楚，有待系统研究。本课题旨在以HCC患者临床病例标本，结合HCC细胞系与动物模型，系统分析ACC1在HCC细胞中的表达及其与患者预后的关系，并系统探讨了ACC1在HCC生长及转移方面的调控作用与机制研究，本课题将有助于进一步加深对肿瘤脂代谢重编程的认识并将为HCC的早期诊断与治疗提供潜在的分子靶标。
【研究目的】
1.通过检测ACC1在肝细胞癌(HCC)中的表达情况，评估了其与118例HCC患者的临床病理特征和术后生存率的关系，并且在公共数据库中验证HCC患者ACC1的mRNA表达情况。2.通过过表达ACC1基因或干涉ACC1基因，检测HCC细胞增殖相关指标及动物模型体内肿瘤生长情况，以此探讨ACC1表达异常改变对HCC疾病进展的影响。3.通过过表达ACC1基因或干涉ACC1基因，检测HCC细胞迁移相关指标及动物模型体内肿瘤转移情况，用于反映ACC1表达异常改变对HCC远处转移的影响。4.对HCC细胞ACC1表达异常改变机制的初步探讨。
【研究方法】
1.使用TCGA及GEO数据库分析ACC1在HCC中表达，并结合qPCR，Westernblot及IHC实验检测ACC1在临床HCC组织标本中的mRNA与蛋白表达水平；2.使用SPSS软件分析ACC1表达与HCC患者的临床病理参数及患者预后的关系；3.采用MTS、EdU及平板克隆实验，在体外检测ACC1对HCC细胞活力、细胞增殖及克隆形成的影响；4.采用流式细胞术分析ACC1对HCC细胞凋亡与周期的调控作用；5.采用裸鼠皮下成瘤实验，在体内分析ACC1对肿瘤生长的影响；6.采用Transwell细胞体外侵袭、迁移及划痕实验检测ACC1对肿瘤侵袭、迁移能力的影响；7.采用裸鼠肝原位成瘤实验，在体内检测ACC1对肿瘤转移能力的影响；8.采用Westernblot等实验方法，检测ACC1表达对肿瘤相关细胞周期与凋亡、侵袭与迁移信号分子与通路的调控；9.采用Westernblot实验方法，研究ACC1促进HCC生长和转移的机制。
【研究结果】
1.TCGA及GEO数据库分析结果显示：ACC1在HCC组织中表达显著高于癌旁正常肝组织；qPCR，WB及IHC实验结果同样显示：ACC1在HCC组织中的mRNA与蛋白水平中均显著高于癌旁正常肝组织；2.SPSS统计分析显示：ACC1与远端转移，肿瘤分化状态及TNM分期显著相关；ACC1高表达组患者生存较ACC1低表达组患者生存时间显著缩短；3.MTS、EdU及平板克隆实验结果显示：ACC1可显著促进HCC细胞的细胞活力、细胞增殖与克隆形成能力；4.流式细胞术检测结果表明：ACC1促进HCC细胞由G1期向S期转化，而抑制HCC细胞凋亡；5.裸鼠皮下成瘤实验结果显示：ACC1可促进HCC的体内生长；6.Transwell细胞体外侵袭、迁移及划痕实验结果显示：ACC1显著促进HCC细胞的侵袭与迁移能力；7.裸鼠肝原位实验结果显示：ACC1可促进体内HCC的转移；8.Westernblot实验结果显示：ACC1通过下调caspase-3、caspase-9、RARP抑制细胞凋亡，同时通过上调CDK4、CDK6、CyclinD1促进HCC细胞G1期向S期转化。ACC1通过下调E-cadherin、上调N-cadherin促进HCC细胞迁移能力；9.Westernblot实验结果显示：ACC1通过上调P-AKT(Ser 473)和P-mTOR(Ser 2448)激活AKT/mTOR信号通路促进HCC生长和转移。
【研究结论】
本课题研究证实HCC中参与脂肪酸代谢调控的关键酶ACC1表达显著上调，且与患者不良预后相关；ACC1通过激活AKT/mTOR信号通路促进HCC的生长和转移。
代谢重编程是肿瘤新的“十大特征”之一，肿瘤代谢重编程主要体现在糖、脂及氨基酸代谢的异常，其中，与葡萄糖或氨基酸代谢相比，肿瘤脂代谢重编程的研究相对较少。乙酰辅酶A羧化酶ACC1(Acetyl-CoA carboxylase)是调控脂肪酸从头合成第一步的限速酶，其主要通过催化乙酰辅酶A生成丙二酰辅酶A而调控脂肪酸合成。课题组前期研究发现，位于ACC1基因rs11871275的SNP位点与肺癌患者术后总生存率显著相关，然而ACC1在HCC中的表达情况及生物学作用尚不十分清楚，有待系统研究。本课题旨在以HCC患者临床病例标本，结合HCC细胞系与动物模型，系统分析ACC1在HCC细胞中的表达及其与患者预后的关系，并系统探讨了ACC1在HCC生长及转移方面的调控作用与机制研究，本课题将有助于进一步加深对肿瘤脂代谢重编程的认识并将为HCC的早期诊断与治疗提供潜在的分子靶标。
【研究目的】
1.通过检测ACC1在肝细胞癌(HCC)中的表达情况，评估了其与118例HCC患者的临床病理特征和术后生存率的关系，并且在公共数据库中验证HCC患者ACC1的mRNA表达情况。2.通过过表达ACC1基因或干涉ACC1基因，检测HCC细胞增殖相关指标及动物模型体内肿瘤生长情况，以此探讨ACC1表达异常改变对HCC疾病进展的影响。3.通过过表达ACC1基因或干涉ACC1基因，检测HCC细胞迁移相关指标及动物模型体内肿瘤转移情况，用于反映ACC1表达异常改变对HCC远处转移的影响。4.对HCC细胞ACC1表达异常改变机制的初步探讨。
【研究方法】
1.使用TCGA及GEO数据库分析ACC1在HCC中表达，并结合qPCR，Westernblot及IHC实验检测ACC1在临床HCC组织标本中的mRNA与蛋白表达水平；2.使用SPSS软件分析ACC1表达与HCC患者的临床病理参数及患者预后的关系；3.采用MTS、EdU及平板克隆实验，在体外检测ACC1对HCC细胞活力、细胞增殖及克隆形成的影响；4.采用流式细胞术分析ACC1对HCC细胞凋亡与周期的调控作用；5.采用裸鼠皮下成瘤实验，在体内分析ACC1对肿瘤生长的影响；6.采用Transwell细胞体外侵袭、迁移及划痕实验检测ACC1对肿瘤侵袭、迁移能力的影响；7.采用裸鼠肝原位成瘤实验，在体内检测ACC1对肿瘤转移能力的影响；8.采用Westernblot等实验方法，检测ACC1表达对肿瘤相关细胞周期与凋亡、侵袭与迁移信号分子与通路的调控；9.采用Westernblot实验方法，研究ACC1促进HCC生长和转移的机制。
【研究结果】
1.TCGA及GEO数据库分析结果显示：ACC1在HCC组织中表达显著高于癌旁正常肝组织；qPCR，WB及IHC实验结果同样显示：ACC1在HCC组织中的mRNA与蛋白水平中均显著高于癌旁正常肝组织；2.SPSS统计分析显示：ACC1与远端转移，肿瘤分化状态及TNM分期显著相关；ACC1高表达组患者生存较ACC1低表达组患者生存时间显著缩短；3.MTS、EdU及平板克隆实验结果显示：ACC1可显著促进HCC细胞的细胞活力、细胞增殖与克隆形成能力；4.流式细胞术检测结果表明：ACC1促进HCC细胞由G1期向S期转化，而抑制HCC细胞凋亡；5.裸鼠皮下成瘤实验结果显示：ACC1可促进HCC的体内生长；6.Transwell细胞体外侵袭、迁移及划痕实验结果显示：ACC1显著促进HCC细胞的侵袭与迁移能力；7.裸鼠肝原位实验结果显示：ACC1可促进体内HCC的转移；8.Westernblot实验结果显示：ACC1通过下调caspase-3、caspase-9、RARP抑制细胞凋亡，同时通过上调CDK4、CDK6、CyclinD1促进HCC细胞G1期向S期转化。ACC1通过下调E-cadherin、上调N-cadherin促进HCC细胞迁移能力；9.Westernblot实验结果显示：ACC1通过上调P-AKT(Ser 473)和P-mTOR(Ser 2448)激活AKT/mTOR信号通路促进HCC生长和转移。
【研究结论】
本课题研究证实HCC中参与脂肪酸代谢调控的关键酶ACC1表达显著上调，且与患者不良预后相关；ACC1通过激活AKT/mTOR信号通路促进HCC的生长和转移。