全反式维甲酸对人肝癌HepG2细胞Oct4的影响及机制研究

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目的应用诱导分化剂全反式维甲酸(ATRA)作用于肝癌细胞HepG2,并从基因表达、信号通路影响水平研究全反式维甲酸对人肝癌细胞HepG2细胞系肿瘤干细胞分化基因Oct4的影响及可能的机制,从信号通路探讨全反式维甲酸诱导肿瘤干细胞分化机制,为临床进一步应用该药物治疗肝癌奠定基础。方法体外培养HepG2细胞,全反式维甲酸作用72小时,溴甲酚绿比色法检测全反式维甲酸处理前后ALb蛋白的分泌量变化;应用RT-PCR检测全反式维甲酸处理前后Oct4、wnt1、β-Catenin转录水平的变化;western-blot检测全反式维甲酸处理前后Oct4、wnt1、β-Catenin蛋白表达水平的变化。结果全反式维甲酸作用72小时,溴甲酚绿比色法显示全反式维甲酸诱导HepG2细胞分化,Alb分泌量明显升高(P<0.05);RT-PCR结果显示全反式维甲酸处理后细胞的Oct4、wnt1、β-Catenin转录水平随着浓度的增加逐渐受到抑制,呈剂量依赖性下调;western-blot结果表明全反式维甲酸处理后细胞的Oct4、wnt1、β-Catenin蛋白表达水平随着浓度的增加逐渐受到抑制,呈剂量依赖性下调。结论1.全反式维甲酸能诱导肝癌细胞HepG2分化,是一种有效的分化诱导剂。2.全反式维甲酸对人肝癌HepG2细胞系肿瘤干细胞分化基因Oct4的影响可能与Wnt/β-catenin信号转导通路有关。
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