地塞米松治疗孕鼠肝内胆汁淤积症中的调控机制探讨

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背景妊娠期肝内胆汁淤积症(Intrahepatic Cholestasis of Pregnancy,ICP)是孕期发生的一种临床综合症,如:孕妇肝损伤出现,肝酶升高,总胆酸异常,胎儿、新生儿缺氧死亡发生等。既往研究表明该病可诱使复杂的胆汁酸基因调控网络发生异常,继发围产儿不良预后结局出现,并且通过现有临床技术手段难以提前预测,找到一种较好的治疗方法或安全有效的预防方式是产科有待解决的一大难题。目的探讨法尼醇受体(Farnesoid X receptor,FXR)/胆盐输出泵(Bile salt export pump,BSEP)对孕激素诱导的妊娠期SD大鼠肝内胆汁淤积症的调控作用及地塞米松的干预机制。方法选择清洁级SD孕鼠45只,随机区组分成3组(阴性对照组:对照组;阳性对照组:模型组;治疗组),每组15只,妊娠第10-14天,每天腹腔注射1次:对照组生理盐水2.5ml/kg/d;模型组及治疗组注射孕酮225mg/kg/d建立动物模型。各组孕鼠于妊娠第10天及第15天分别采心脏血2ml,测定血生化指标。治疗组造模成功后于妊娠d15-19天,每天1次大腿内侧肌肉注射地塞米松1mg/kg,妊娠第20天采集心脏血2mL备用。3组孕鼠出现临产征兆时立即行剖宫终止妊娠,记录胎鼠数,死胎数,测量胎鼠体重;取孕鼠肝脏组织观察病理学变化,采用逆转录聚合酶链反应技术检测FXR、BSEP两者mRNA的表达,蛋白质印迹法检测两者蛋白的表达。结果(1)各组孕鼠血生化指标用药前差异无统计学意义(P>0.05),模型组用药后血清总胆酸(Total bile acid,TBA)及谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)明显升高(P<0.05),地塞米松干预前后比较,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)HE染色:模型组孕鼠汇管区肝细胞出现水肿,肝血窦间隙变窄,少许肝细胞出现脂肪变性;治疗组孕鼠肝细胞排列整齐无明显水肿,无脂肪变性,肝血窦间隙正常。(3)死胎率比较:模型组显著高于对照组,治疗组显著低于模型组(P<0.05)。(4)各组胎鼠体重比较:模型组明显低于对照组和治疗组,差异有统计学意义(P<0.05)。(5)模型组孕鼠肝脏中FXR、FXRmRNA的表达上调,BSEP、BSEPmRNA的表达下调(P<0.05);治疗组与模型组比较孕鼠肝脏中FXR、FXRmRNA表达下调,BSEP、BSEPmRNA的表达上调(P<0.05)。结论地塞米松干预ICP的调控机制可能是通过减少了妊娠大鼠肝脏FXR的表达,上调BSEP的表达,降低了机体对孕激素及其代谢产物的敏感性,从而对胆汁淤积孕鼠的肝脏功能起到了保护作用,并有效减少胎鼠不良预后的出现。
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