【摘 要】
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目的 新生儿细菌血流感染(bloodstream infection,BSI)是严重威胁新生儿健康甚至生命的常见病,具有较高的病死率。目前,临床确诊依赖于细菌培养,但该方法阳性率低而且耗时长,
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目的 新生儿细菌血流感染(bloodstream infection,BSI)是严重威胁新生儿健康甚至生命的常见病,具有较高的病死率。目前,临床确诊依赖于细菌培养,但该方法阳性率低而且耗时长,无法做出早期诊断。因此,选择快速、可靠的细菌检测方法具有重要的临床意义。近年来,细菌16S rRNA基因(16S rDNA)作为细菌鉴定的理想靶基因日益受到人们重视。本课题主要研究16S rDNA检测在早期诊断新生儿细菌血流感染中的应用价值,并与血培养及常用的非特异性诊断指标进行比较。 方法 在16S rRNA基因保守区选用一对通用引物(universal primer,UP),收集临床中常见的致病菌菌株37株,提取细菌DNA进行聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR),采用2%琼脂糖凝胶电泳(agarose gel electrophoresis,AGE)观察扩增结果,并进行PCR灵敏性及特异性试验。对106例临床拟诊为新生儿细菌血流感染的患儿于入院24小时内,在严格无菌操作下采集血标本,提取DNA进行PCR扩增,同时查血培养,CRP、血常规及血沉。对同期住院的20例非感染性疾病患儿也采集血标本进行PCR及部分感染指标检查。用SPSS11.5 FOR Windows进行临床资料数据分析。 结果 所有细菌PCR均得到预期的约371bp大小的扩增产物,该引物仅扩增细菌DNA,与病毒及人基因组DNA无交叉反应,其扩增下限
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