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目的:建立人肺癌小鼠高转移模型,同时观察模型的相关生物学特性,探讨转移相关差异基因表达,为肺癌的机理研究、诊断和防治等提供理想的动物模型。
方法:1、采用手术切除小鼠皮下移植瘤的方法建立裸小鼠人肺癌NCI-H460术后转移模型,动态观察其远处各脏器转移情况,并采用免疫组化法检测MMP-2、OPN、CD44v6、CD62等蛋白在转移灶及原发灶的表达情况;2、采用皮下移植→肺转移灶→皮下移植的体内循环筛选方法建立NOD-SCID小鼠人肺癌SPC-A-1皮下移植高转移模型,并进行肿瘤的生长和转移情况、组织病理学、超微结构观察,同时建立相应的高转移细胞系,进行各种相关生物学特性观察;3、利用cDNA芯片技术对比分析筛选前、后肿瘤细胞中差异表达基因。
结果:1、通过手术切除肿瘤的方法不仅延长了小鼠的生存时间,同时使肺转移率达100%,免疫组化检测发现MMP-2、OPN、CD44v6、CD62、E-cadherin、Timp-2在肺转移灶内的表达明显高于原发灶,CD54和MMP-9在转移灶内的表达则低于原发灶;2、通过4代体内反复筛选成功建立了100%肺转移NOD-SCID小鼠高转移模型及相应高转移细胞系SPC-A-1(T),相关细胞学实验表明该细胞系倍增时间较短,恶性程度较高,细胞增殖较旺盛;3、基因芯片筛选获得7649条差异表达基因,基因功能涉及细胞黏附、凋亡、转录、信号传导、细胞周期和代谢等。
结论:1、成功建立了人肺癌裸小鼠术后转移模型,并提示肺癌转移的发生可能与部分粘附分子的表达异常相关;2、通过体内筛选成功建立了人肺癌皮下移植瘤高转移模型及高转移细胞系;3、基因芯片高通量筛选提示7000余条基因可能与人肺癌转移相关。本研究为肺癌防治研究及抗转移治疗提供了理想的动物模型,为进一步研究肺癌的转移机制提供了参考依据。