内质网应激和自噬在慢性房颤患者中的作用

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目的:心房颤动(Atrial fibrillation,AF)是临床上极为常见的心律失常之一。由于其可引起血流动力学障碍和血栓栓塞的发生,严重危害人们的身心健康,因此探讨其发病机制十分必要。研究表明,心肌细胞凋亡所致的心房重构是AF发生和维持的重要机制之一,逆转心房重构可防止AF的发生。内质网应激(Endoplasmic reticulum stress,ERS)反应和自噬均可介导细胞凋亡信号转导通路,引起心肌细胞凋亡,导致组织损伤。然而,目前有关ERS和自噬与AF关系的研究较少,尤其是与AF患者左心耳(Left atrial appendage;LAA)形态结构改变的关系鲜有报道。为此,本研究对慢性AF患者血浆中ERS和自噬的相关因子水平进行检测,旨在进一步探讨它们与AF的关系,为临床防治AF提供新的思路。方法:1.对象选择:依据2016年欧洲AF管理指南选择2017年1月-2018年1月于我院住院慢性AF患者63例,男37例,女26例,平均年龄68.05±10.41岁。其中阵发性AF(Paroxysmal atrial fibrillation;PAF)患者27例,男15例,女12例,平均年龄65.78±9.31岁;持续性AF(Persistent atrial fibrillation;PeAF)患者18例,男12例,女6例,平均年龄69.72±10.59岁;永久性AF(Permanent atrial fibrillation;PmAF)患者18例,男10例,女8例,平均年龄69.78±11.66岁。窦性心律(Sinus rhythm;SR)组患者15例,男8例,女7例,平均年龄62.80±8.97岁,无心律失常及AF病史。根据《赫尔辛基宣言》精神,患者检查前需要经医院伦理委员会审准,并征得患者及家属知情同意。所有患者均记录年龄、性别、血压、有关实验室检查、心电图及超声心动图(心脏、腹部)。其中13例PAF患者和10例PeAF患者行经食道超声心动图(transesophageal echocardiography,TEE)检查。排除恶性肿瘤、感染性疾病、肺纤维化、心功能III~IV级(NYHA分级)、严重肝肾功能不全、缺血性心肌病、近期(1个月内)急性心肌梗死、心肌病、风湿性和瓣膜性心脏病、严重高血压未控制(血压≥160/100mmHg)、内分泌性疾病(醛固酮增多症、Cushing病、甲亢或甲减等)、自身免疫性疾病、近期(1个月内)重大手术史等。2.实验方法:所有入选患者收集空腹肘静脉血5m L,离心,取上清液,并于-80°保存,ELISA法测定血浆中葡萄糖调节蛋白78(Glucose regulated protein 78,GRP78)、CCAAT/增强子结合蛋白同源蛋白(CCAAT/enhancer binding protein homologous protein,CHOP)和Beclin-1的水平。行TEE患者检查前禁食、水至少8~12h,术前检查结果正常,签署知情同意书,口含20m L盐酸奥布卡因凝胶行咽部粘膜局部麻醉,连接心电图,取平卧位,经咬口器将探头送入食道,于45°和90°左右留取LAA清晰二维图像及开口处血流速度频谱图像,测量左心耳开口的宽度(Left atrial appendage width;LAAW)、左心耳长度(Left atrial appendage length;LAAL),并在AF心律下测量LAA血流频谱中的最大正向波和最大负向波分别为左心耳排空速度(Left atrial appendage emptying velocity;LAA-EV)和充盈速度(Left atrial appendage filling velocity;LAA-FV)。3.统计学方法:利用SPSS 21.0统计软件进行数据分析,计量资料用均数±标准差(`X±S)表示,计数资料用χ~2检验,组间比较用单因素t检验,组内比较用单因素方差分析(ANOVA),相关性分析应用直线相关分析,P<0.05为差异有统计学意义。结果:1.AF组患者血浆中GRP78、CHOP和Beclin-1的水平均高于SR组患者血浆中GRP78、CHOP和Beclin-1的水平,两组相比差异有统计学意义(P<0.05)。2.PeAF患者血浆中GRP78、CHOP和Beclin-1的水平均高于PAF患者血浆中GRP78、CHOP和Beclin-1的水平,两组相比差异有统计学意义(P<0.05);PmAF患者血浆中GRP78、CHOP和Beclin-1的水平均高于PAF患者血浆中GRP78、CHOP和Beclin-1的水平,两组相比差异有统计学意义(P<0.05);PeAF患者血浆中GRP78、CHOP和Beclin-1的水平略高于PmAF患者血浆中GRP78、CHOP和Beclin-1的水平,但两组相比差异无统计学意义(P>0.05)。3.测量LAA各项指标的AF患者中,PeAF患者LAAW和LAAL均高于PAF患者,LAA-EV和LAA-FV均低于PAF患者,两组相比差异有统计学意义(P<0.05),且PeAF患者血浆中GRP78、CHOP和Beclin-1水平均高于PAF患者血浆中GRP78、CHOP和Beclin-1水平,两组相比差异有统计学意义(P<0.05)。4.血浆中GRP78的水平分别与LAAW和LAAL呈正相关,差异有统计学意义(r=0.571,P<0.05;r=0.592,P<0.05);与LAA-EV和LAA-FV呈负相关,差异有统计学意义(r=-0.599,P<0.05;r=-0.48,P<0.05)。血浆中CHOP的水平分别与LAAW和LAAL呈正相关,差异有统计学意义(r=0.498,P<0.05;r=0.439,P<0.05);与LAA-EV和LAA-FV呈负相关,差异有统计学意义(r=-0.421,P<0.05;r=-0.438,P<0.05)。血浆中Beclin-1的水平分别与LAAW和LAAL呈正相关,差异有统计学意义(r=0.419,P<0.05;r=0.5,P<0.05);与LAA-EV和LAA-FV呈负相关,差异有统计学意义(r=-0.487,P<0.05;r=-0.526,P<0.05)。结论:1.ERS和自噬与慢性AF的发生发展及维持密切相关。2.LAAW、LAAL、LAA-EV和LAA-FV参与了AF的病理过程。3.ERS和自噬与LAA结构重构有一定的关系。4.ERS和自噬对AF的病情进展可能有一定的预测作用。
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