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目的：卵巢的卵泡发育是一个较为复杂的过程。它主要包括卵母细胞生长、颗粒细胞增殖、分化、闭锁、凋亡等重要事件。在这一过程中，多种蛋白水解酶参与了这些重要事件的调控。lmp2是蛋白水解酶复合体中的一个重要的功能性亚单位，它对蛋白水解酶复合体发挥水解酶活性至关重要。lmp2生殖系统中的研究较少；特别是在卵巢的发育中的作用尚未有报道。因此，本研究探索了在卵泡发育过程中，lmp2基因的表达规律及其可能的作用。
研究方法：本文应用HE染色、免疫组化、细胞凋亡检测技术TUNEL、原代颗粒细胞体外培养及westernblot的方法检测了lmp2在大鼠不同发育时期卵泡及人工体外诱导卵泡闭锁凋亡的卵泡中的表达情况。将未成年大鼠（21日龄）注射孕马血清（PMSG），注射12、24、36和48小时后分别收集卵巢，注射PMSG24小时的基础上再注射anti—PMSG抗体24小时后收集卵巢，进行石蜡切片；分别选取相邻的连续切片，苏木素—伊红（HE）染色观察PMSG诱导后大鼠卵泡不同发育阶段的形态及体外诱导闭锁的卵泡形态；免疫组化方法检测lmp2的表达情况；细胞凋亡检测技术TUNEL检测lmp2的表达模式与卵泡闭锁及卵泡颗粒细胞程序性死亡的相互关系。另外，体外相同条件诱导大鼠卵泡发育到不同时期及闭锁后，用针头刺破卵泡，400目细胞筛网分离颗粒细胞，用NP40裂解液裂解卵泡颗粒细胞收集全细胞总蛋白；westernblot方法检测lmp2在发育不同阶段及闭锁卵泡中的表达。
结果显示：在大鼠卵巢发育的初级卵泡阶段，lmp2的表达较高，在大腔卵泡时期lmp2表达较低；与之对应的TUNEL实验结果，表明lmp2表达高的卵泡有凋亡信号；在体外诱导卵泡发生闭锁凋亡的卵泡中，TUNEL染色与lmp2的表达位置有较强的对应关系；在westernblot的结果中，在卵泡发育前期即初级卵泡阶段，lmp2的表达较高，而在大腔卵泡时期，lmp2的表达处在相对较低的水平。
结论：westernblot结果与免疫组化结果表明lmp2在不同发育时期卵泡中有相似表达规律。讨论：本论文首次在卵巢中探索lmp2是否发挥作用及怎样发挥作用，并作了较为深入的研究。经过理论探讨和实验探索验证，结果证明，在卵巢的卵泡发育过程中，lmp2有明显的表达且有差异。通过以上实验结果表明，lmp2可能参与卵泡发育、闭锁和颗粒细胞凋亡等重要过程。lmp2在卵泡发育过程中可能通过引起颗粒细胞的凋亡，诱导卵泡发生闭锁凋亡。以上结果暗示，lmp2可能成为治疗卵巢相关疾病的新的靶点，并且为在以后的研究卵巢相关疾病的发病机理的过程中，提供相关的线索。