莱克多巴胺对成年大鼠睾丸类固醇激素合成急性调控蛋白(StAR)基因mRNA表达的影响

来源 :暨南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:alexzc1984
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目的探讨β2肾上腺素受体激动剂莱克多巴胺(Ractopamine, RAC)一次性给药后,不同剂量作用和不同恢复时间后对成年大鼠睾丸类固醇激素合成急性调控蛋白(Steroidogenic Acute Regulatory Protein, StAR)基因mRNA表达的影响。探讨RAC急性给药14 d后不同剂量作用和不同恢复时间后对成年大鼠睾丸StAR基因mRNA表达的影响。以期了解RAC对睾丸基因StAR的作用机制。实验动物及给药实验动物为9-10周龄的SPF级雄性SD大鼠,体重220-250g。用于RAC一次性给药实验的大鼠28只,随机均分为7组;用于RAC给药14 d的大鼠130只,随机均分为26组。按照给药剂量和恢复时间设置:对照组N、D、D’组(0 mg/kg-day), A、A’、E、E’、O、R组(200 mg/kg-day), B、B’、F、F’、P. S组(20 mg/kg-day)组,C、C’、G、G’、Q、T、H、H’、K、K’组(2 mg/kg-day),I、I’L、L’(0.2 mg/kg-day)组,J、J’、M、M’组(0.02 mg/kg-day)。O-Q 3组为给药(经口灌胃)一次,恢复24 h;R-T 3组为恢复7 d。A-C,A’-C’6组为给药14 d恢复21 d;E-G 3组为恢复14 d; E’-G’、H-J、H’-J’9组为恢复7 d;K-M、K’-M’6组为恢复1 d。各实验组RAC以0.9%的生理盐水于给药前1 h配制,对照组N、D和D’组以等量生理盐水代替RAC。实验方法各实验组均检测大鼠体重、睾丸重量;应用半定量RT-PCR技术检测睾丸基因StARmRNA的表达变化。以StAR与GAPDH的PCR产物电泳条带灰度值之比作为反映StAR mRNA水平的相对指标,StAR mRNA水平数据以平均值士标准差表示,两组间比较采用t检验,采用单因素方差分析进行多组间比较。P<0.05为差异具有显著性。StAR mRNA水平与RAC剂量的关系采用等级相关分析(Spearman系数),P<0.05为差异有统计学意义。StAR mRNA水平与RAC剂量的关系进行直线线性回归分析(Linear Regression Analyze), P<0.05为差异有统计学意义。结果1.大鼠体重及睾丸重量的变化一次性给药O和R组(200 mg/kg-day)大鼠体重与对照组相比显著增加(P<0.05),其余各组大鼠体重变化无显著差异(P>0.05);急性实验给药14 d的I、J、L及M组大鼠体重与对照组相比体重变化无显著差异(P>0.05),其余各组均显著增加(P<0.05);实验各组大鼠睾丸重量和睾丸系数与对照组相比无显著差异(P>0.05)。2.大鼠睾丸基因StAR的mRNA表达变化单因素方差分析结果显示,一次性给药实验各组大鼠睾丸基因StAR mRNA表达量和急性实验给药14 d的J’组与对照组相比无显著差异(P>0.05);其他各组显著降低(P<0.05)。一次性给药实验各组的等级相关分析结果显示,大鼠睾丸基因StAR mRNA表达量与RAC的剂量呈显著负相关(rs=-0.475,P<0.05);与RAC给药后恢复时间相关性不显著(P>0.05)。线性回归分析结果显示,StAR基因mRNA表达量与RAC的剂量线性回归关系无显著意义(P>0.05)。急性实验给药14 d各组的等级相关分析结果显示,大鼠睾丸基因StAR mRNA表达量与RAC的剂量呈负相关(rs=-0.476,P<0.01)且具有非常显著意义(P<0.01);与RAC给药后恢复时间呈负相关(rs=-0.229,P<0.05)。线性回归分析结果显示,StAR基因mRNA表达量与RAC的剂量呈线性回归关系(b=-0.001,P<0.05)。结论1.RAC能使成年雄性大鼠体重增加,但对大鼠睾丸重量的影响无显著意义。提示RAC能使成年雄性大鼠体内肌肉蛋白合成增加,分解减少,提高了肌肉含量,进而增加体重。2.RAC一次性给药组大鼠睾丸基因StAR mRNA表达量与对照组相比无显著差异(P>0.05),但RAC急性给药14 d各组(除J’组)大鼠睾丸基因StAR mRNA表达量与对照组相比均显著降低(P<0.05)。3.RAC对大鼠睾丸基因StAR mRNA表达的影响有剂量和时间双重相关性,同时,大鼠睾丸基因StAR mRNA表达和RAC给药剂量有线性回归关系。提示RAC给药14 d可降低大鼠睾丸基因StAR的mRNA表达量,降低类固醇激素的合成,进而影响支持细胞,生精细胞等睾丸细胞的正常功能。
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